Si'usi'u Isu SuperDirect PCR Kit Direct PCR Lysis Reagent(Si'u isumu)(mo Genotyping)
Fa'amatalaga o pusa:
Fa'aaoga sa'o le lysate si'usi'u o isumu e fai ma fa'ata'ita'iga mo le fa'alauteleina o le PCR, e aunoa ma le fa'aesea o le DNA, vave ma maualuga le lagona.
◮E leai se taimi e alu ai ma taugata DNA e manaʻomia.
◮O le faʻataʻitaʻiga manaʻomia e laʻititi, naʻo le ave o le fatu e tasi.
◮E leai ni togafitiga faʻapitoa e pei o le oloina ma le tuʻimomomoina e manaʻomia, ma o le taotoga e faigofie.
◮Ole faiga ole PCR sili ona lelei e mafai ai e le PCR ona maua le fa'apitoa maualuga ma le fa'apalepale malosi atu ile iniseti tali ole PCR.
Fa'amatalaga
O lenei pusa e faʻaogaina ai se faiga faʻapipiʻi lysis faʻapitoa e faʻasaʻo vave ai le DNA genomic mai le siʻusiʻu o isumu ma faʻataʻitaʻiga taliga isumu mo PCR tali, o lea e fetaui lelei mo suʻega faʻatupu tele.
Ua maeʻa le faʻagasologa o le tuʻuina atu o DNA genomic mai le lysis bufferi totonu ole 10-30 minuteivevela potu (20-25°C).Leai se fa'avevela e mana'omia, ma isi faiga e pei ole polotini ma le RNA e le mana'omia.Ole aofa'i ole DNA na fa'amatu'u mai e mafai ona fa'aogaina e fai ma Fa'ata'ita'iga mo le tali atu ole PCR.
2×M-PCR FaigofieTM Faafefiloi e malosi le faapalepale i PCR tali inhibitors, ma e mafai ona faaaoga le lysate o le faataitaiga e tofotofoina e avea o se mamanu mo le amplification lelei ma patino.O lenei mea fa'afoliga e aofia ai Foregene D-Taq DNAPolymerase, dNTPs, MgCl2, tali fa'afefete, PCR optimizer ma fa'amautu.
O le D-Taq DNA polymerase o se DNA polymerase na fa'apitoa ona atia'e e Foregene mo tali sa'o PCR.O le D-Taq DNA polymerase e malosi lona fa'apalepale i ituaiga PCR fa'alavelave fa'alavelave, ma e mafai ona fa'atupuina lelei le aofa'i o DNA i faiga fa'alavelave lavelave eseese, ma e mafai ona o'o atu i le 2Kb/min le saoasaoa fa'aopoopo, lea e fetaui lelei mo le tali atu o le PCR Direct.
Fa'amatalaga
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
Vaega o pusa
| Vaega I | Puipui NP |
| Foregene Protease Plus I | |
| 6x DNA Loading Buffer | |
| Vaega II | 2× M PCR EasyTM Mix |
| Faatonuga | |
Fa'apitoa & itu lelei
■E leai se taimi e alu ai ma taugata DNA e manaʻomia.
■ E la'ititi le mana'oga fa'ata'ita'i, na'o le ave o si'usi'u o isumu (po'o taliga isumu e 2-5mm le lautele) i luga a'e o le 2mm.
■ Faigofie e faagaoioia, e mafai ona lysed e aunoa ma le vevela e inactivate le protease, ma le oloa lysed e mafai ona tuusao i lalo PCR tali.
■ Foregene Mouse Tail Genomic DNA Extraction Kit (DE-05211) e mafai ona fa'aoga e aveese mai ai le DNA genomic mai le si'usi'u iole ua fa'agaioia.
■ Optimized PCR system e maua ai le PCR e maualuga atu le fa'apitoa ma le malosi o le fa'apalepale i PCR tali fa'alavelave.
Fa'asologa o pusa
Fa'aoga: Si'u isumu, taliga isumu, maso ma isi mea.
DNA fa'amatu'u mai le fa'ata'ita'iga lysis: na'o le fa'aaogaina o se ata PCR.
O le pusa e mafai ona faʻaogaina mo faʻamoemoega nei: faʻamaonia o le transgenosis, faʻasologa o manu, ma isi.
Fa'agasologa o galuega
Teuina ma le ola fa'asao
Vaega I o lenei pusa e tatau ona teuina ile 2-8℃.
E mafai ona teuina le Reagent Buffer FP mo le 12 masina i lalo o tulaga mago;e mafai ona teuina i le 2-8 ℃ mo le teuina umi.
Reagent Foregene Protease ei ai se fua fa'atatau.Ina ia mautinoa lona gaioiga ma le mautu, faʻamolemole teu i le 4 ℃ mo le 12 masina.
Reagent 6×DNA Loading Buffer e mafai ona teuina i le 4 ℃ poʻo le -20 ℃ mo se taimi umi.
Vaega II o lenei pusa e tatau ona teuina ile -20℃.
Reagent 2 × PCR EasyTM Mix, pe a faʻaaoga soo, e mafai foi ona teuina i le 4 ℃ mo le teuina mo taimi pupuu (faʻaaoga i totonu ole 10 aso).
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