Pusa PCR Fa'asa'o Si'usi'u Isu Sa'o PCR Lysis Reagent(Si'usi'u I'u)(mo Genotyping)
Fa'amatalaga
O lenei pusa o loʻo faʻaogaina se faiga faʻapipiʻi lysis faʻapitoa e faʻasaʻo vave ai le DNA genomic mai siʻusiʻu o isumu, taliga, maso ma isi faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga mo tali PCR, o lea e fetaui lelei mo suʻesuʻega faʻatupu tele.
O le faagasologa o le tuʻuina atu o DNA genomic mai le lysis buffer e maeʻa i totonu ole 10-30 minute ile 65°C.Leai se isi faiga e pei ole polotini ma le RNA aveese e mana'omia, ma o le DNA fa'amatuu e mafai ona fa'aoga e fai ma fa'ata'ita'iga mo le tali atu o le PCR.
2× M1-PCR FaigofieTMFaafefiloi e malosi le faapalepale i PCR tali inhibitors, ma e mafai ona faaaoga le lysate o le faataitaiga e tofotofoina e avea o se mamanu mo le amplification lelei ma patino.O lenei mea fa'afoliga e aofia ai Foregene D-Taq DNAPolymerase, dNTPs, MgCl2, tali fa'afefete, PCR optimizer ma fa'amautu.
O le D-Taq DNA polymerase o se DNA polymerase na fa'apitoa ona atia'e e Foregene mo tali sa'o PCR.O le D-Taq DNA polymerase e malosi lona fa'apalepale i ituaiga PCR fa'alavelave fa'alavelave, ma e mafai ona fa'atupuina lelei le aofa'i o DNA i faiga fa'alavelave lavelave eseese, ma e mafai ona o'o atu i le 2Kb/min le saoasaoa fa'aopoopo, lea e fetaui lelei mo le tali atu o le PCR Direct.
Fa'amatalaga
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
Vaega o pusa
Vaega I | Faipule faipule |
Foregene Protease Plus | |
6x DNA Loading Buffer | |
Vaega II | 2× M1 PCR FaigofieTMFaafefiloi |
Faatonuga |
Fa'apitoa & itu lelei
■E leai se taimi e alu ai ma taugata DNA e manaʻomia.
■ O le faʻataʻitaʻiga manaʻoga e laʻititi, e pei o le 5mg isi isumu poʻo le 2-5mm siʻusiʻu isumu e mafai ona suʻeina.
■E leai ni togafitiga faʻapitoa e pei o le oloina ma le tuʻimomomoina e manaʻomia, ma o le taotoga e faigofie.
■ O le faiga o le PCR sili ona lelei e maua ai le PCR e maualuga atu le tulaga maʻoti ma sili atu le faʻapalepale i PCR tali faʻalavelave.
Fa'asologa o pusa
Fa'aoga: Si'u isumu, taliga isumu, maso ma isi mea.
DNA fa'amatu'u mai le fa'ata'ita'iga lysis: na'o le fa'aaogaina o se ata PCR.
O le pusa e mafai ona faʻaogaina mo faʻamoemoega nei: faʻamaonia o le transgenosis, faʻasologa o manu, ma isi.
Fa'agasologa o galuega
Teuina ma le ola fa'asao
Vaega I o lenei pusa e tatau ona teuina i le 2-8℃.
E mafai ona teuina le Reagent Buffer AL mo le 12 masina i lalo o tulaga mago;e mafai ona teuina i le 2-8℃mo le teuina umi.
Reagent Foregene Protease ei ai se fua fa'atatau.Ina ia mautinoa lona gaioiga ma le mautu, faamolemole teu i le 4℃mo le 12 masina.
Reagent 6×DNA Loading Buffer e mafai ona teuina i le 4℃pe -20℃mo se taimi umi.
Vaega II o lenei pusa e tatau ona teuina i le -20℃.
Reagent 2×M1 PCR FaigofieTMFaafefiloi, pe a faʻaaoga soo, e mafai foi ona teuina i le 4℃mo le teuina mo taimi pupuu (fa'aaoga i totonu ole 10 aso).