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itulau_fanua

Pusa PCR Fa'asa'o Si'usi'u Isu Sa'o PCR Lysis Reagent(Si'usi'u I'u)(mo Genotyping)

Fa'amatalaga o pusa:

Fa'aaoga sa'o le lysate si'usi'u o isumu e fai ma fa'ata'ita'iga mo le fa'alauteleina o le PCR, e aunoa ma le fa'aesea o le DNA, vave ma maualuga le lagona.

E leai se taimi e alu ai ma taugata DNA e manaʻomia.

O le faʻataʻitaʻiga manaʻomia e laʻititi, naʻo le ave o le fatu e tasi.

E leai ni togafitiga faʻapitoa e pei o le oloina ma le tuʻimomomoina e manaʻomia, ma o le taotoga e faigofie.

Ole faiga ole PCR sili ona lelei e mafai ai e le PCR ona maua le fa'apitoa maualuga ma le fa'apalepale malosi atu ile iniseti tali ole PCR.

malosi mua'i


Fa'amatalaga Oloa

Faailoga o oloa

Fa'amatalaga

O lenei pusa o loʻo faʻaogaina se faiga faʻapipiʻi lysis faʻapitoa e faʻasaʻo vave ai le DNA genomic mai siʻusiʻu o isumu, taliga, maso ma isi faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga mo tali PCR, o lea e fetaui lelei mo suʻesuʻega faʻatupu tele.

O le faagasologa o le tuʻuina atu o DNA genomic mai le lysis buffer e maeʻa i totonu ole 10-30 minute ile 65°C.Leai se isi faiga e pei ole polotini ma le RNA aveese e mana'omia, ma o le DNA fa'amatuu e mafai ona fa'aoga e fai ma fa'ata'ita'iga mo le tali atu o le PCR.

2× M1-PCR FaigofieTMFaafefiloi e malosi le faapalepale i PCR tali inhibitors, ma e mafai ona faaaoga le lysate o le faataitaiga e tofotofoina e avea o se mamanu mo le amplification lelei ma patino.O lenei mea fa'afoliga e aofia ai Foregene D-Taq DNAPolymerase, dNTPs, MgCl2, tali fa'afefete, PCR optimizer ma fa'amautu.

O le D-Taq DNA polymerase o se DNA polymerase na fa'apitoa ona atia'e e Foregene mo tali sa'o PCR.O le D-Taq DNA polymerase e malosi lona fa'apalepale i ituaiga PCR fa'alavelave fa'alavelave, ma e mafai ona fa'atupuina lelei le aofa'i o DNA i faiga fa'alavelave lavelave eseese, ma e mafai ona o'o atu i le 2Kb/min le saoasaoa fa'aopoopo, lea e fetaui lelei mo le tali atu o le PCR Direct.

 

Fa'amatalaga

50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns

Vaega o pusa

Vaega I

Faipule faipule

Foregene Protease Plus

6x DNA Loading Buffer

Vaega II

2× M1 PCR FaigofieTMFaafefiloi

Faatonuga

Fa'apitoa & itu lelei

E leai se taimi e alu ai ma taugata DNA e manaʻomia.

■ O le faʻataʻitaʻiga manaʻoga e laʻititi, e pei o le 5mg isi isumu poʻo le 2-5mm siʻusiʻu isumu e mafai ona suʻeina.

■E leai ni togafitiga faʻapitoa e pei o le oloina ma le tuʻimomomoina e manaʻomia, ma o le taotoga e faigofie.

■ O le faiga o le PCR sili ona lelei e maua ai le PCR e maualuga atu le tulaga maʻoti ma sili atu le faʻapalepale i PCR tali faʻalavelave.

Fa'asologa o pusa

Fa'aoga: Si'u isumu, taliga isumu, maso ma isi mea.

DNA fa'amatu'u mai le fa'ata'ita'iga lysis: na'o le fa'aaogaina o se ata PCR.

O le pusa e mafai ona faʻaogaina mo faʻamoemoega nei: faʻamaonia o le transgenosis, faʻasologa o manu, ma isi.

Fa'agasologa o galuega

wk flw-mouse si'usi'u sa'o PCR

Teuina ma le ola fa'asao

Vaega I o lenei pusa e tatau ona teuina i le 2-8.

E mafai ona teuina le Reagent Buffer AL mo le 12 masina i lalo o tulaga mago;e mafai ona teuina i le 2-8mo le teuina umi.

 Reagent Foregene Protease ei ai se fua fa'atatau.Ina ia mautinoa lona gaioiga ma le mautu, faamolemole teu i le 4mo le 12 masina.

 Reagent 6×DNA Loading Buffer e mafai ona teuina i le 4pe -20mo se taimi umi.

Vaega II o lenei pusa e tatau ona teuina i le -20.

 Reagent 2×M1 PCR FaigofieTMFaafefiloi, pe a faʻaaoga soo, e mafai foi ona teuina i le 4mo le teuina mo taimi pupuu (fa'aaoga i totonu ole 10 aso).


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