La'au Aofa'i RNA Tu'uesea Pusa Aofa'i RNA Purificaiton Kit mo La'au La'au maualalo i Polysaccharides ma Polyphenols
Fa'amatalaga
50 Sauniuniga, 200 Sauniuniga
O lo'o fa'aogaina e le pusa le koluma vili ma fua fa'atatau na faia e Foregene, lea e mafai ona fa'asa'oina lelei ai le RNA atoa ma le mama mai le tele o auga o la'au e maualalo le polysaccharides ma polyphenols.Mo fa'ata'ita'iga o la'au e maualuga le polysaccharides po'o polyphenols, e fautuaina le fa'aogaina o le Plant Total RNA Isolation Plus Kit e maua ai ni fa'ai'uga lelei o le RNA.O le pusa e maua ai le DNA-Cleaning column lea e faigofie ona aveese genomic DNA mai le supernatant ma le tissue lysate.RNA-na'o le koluma e mafai ona fusia lelei le RNA.E mafai e le pusa ona fa'agasolo le tele o fa'ata'ita'iga i le taimi e tasi.
O le polokalama atoa e le o iai le RNase, o lea o le RNA mama o le a le faʻaleagaina.E mafai e Buffer PRW1 ma Buffer PRW2 ona fa'amautinoa o le RNA na maua e le o fa'aleagaina e le polotini, DNA, ion, ma mea fa'aola.
Vaega o pusa
| Puipui PSL1, Puipui PS, Puipui PSL2 |
| Puipui PRW1, Puipui PRW2 |
| RNase-Free ddH2O, DNA-Cleaning Column |
| RNA-Na'o Koluma |
| Faatonuga |
Fa'apitoa & itu lelei
■ Fa'agaioiga i le vevela o le potu (15-25 ℃) i le faagasologa atoa, e aunoa ma le ta'ele aisa ma le centrifugation maualalo.
■ Pusa atoatoa RNase-Free, leai se mea e popole ai i le faʻaleagaina o le RNA.
■ DNA-Cleaning Column o lo'o pipii fa'apitoa ile DNA, ina ia mafai e le pusa ona aveese fa'ama'i genomic DNA e aunoa ma le fa'aopoopoina o le DNase.
■ Mauaina RNA maualuga: RNA-na'o Koluma ma fua fa'atatau e mafai ona fa'amama lelei le RNA.
■ Saosaoa vave: faigofie ona faagaoioia ma mafai ona faamaeaina i totonu o le 30 minute.
■ Saogalemu: e le mana'omia se reagent.
■ Tulaga maualuga: O vaega RNA faʻamamaina e maualuga le mama, e leai se polotini ma isi mea leaga, ma e mafai ona faʻafeiloaʻi i le tele o faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga.
Fa'aoga pusa
E talafeagai mo le aveeseina ma le faʻamamaina o le RNA atoa mai faʻataʻitaʻiga o aano o laʻau fou poʻo faʻaisa (aemaise lau laulaau fou) e maualalo le polysaccharide ma le polyphenol.
Fa'agasologa o galuega
Ata
La'au Aofa'i RNA Isolation Kit Plus na gaosia le 50mg o laula'au fou o polysaccharides ma polyphenols, ma le 5% RNA fa'amamaina na fa'ata'ita'iina e le electrophoresis.
1: Fa'i
2: Ginkgo
3: Cotton
4: Rimoni
Teuina ma le ola fa'asa
E mafai ona teu le pusa mo le 12 masina i le vevela o le potu (15-25 ℃) i le si'osi'omaga mago, ma le 2-8 ℃ mo se taimi umi (24 masina).
E mafai ona teuina Buffer PSL1 i le 4 ℃ mo le 1 masina pe a uma ona faʻaopopo le 2-hydroxy-1-ethanethiol(filifiliga).
Taiala Iloiloga o Faafitauli
Le au'ili'iliga o lo'o i lalo o fa'afitauli e te ono feagai maLa'au Aofa'iRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.
Ua poloka le koluma vili
O le polokaina o le koluma vili o le a mafua ai ona faʻaitiitia le fua o le RNA pe le mafai foi ona faʻamamaina e maua ai le RNA, ma o le a maualalo le lelei o le RNA maua.
Iloiloga Mafua'aga masani:
1. O le faʻataʻitaʻiga e leʻo motusia atoa.
Ole fa'ata'ita'iga fa'ata'ita'iga le atoatoa e mafai ona poloka ai le DNA-Cleaning Column, lea e mafai fo'i ona a'afia ai le fua ma le lelei ole RNA.Matou te fautuaina pe a fai le fa'ata'otoga fa'ata'ita'iga, fa'atopetope ona olo i le aofa'i o le nitrogen vai e talepe ai a'a e pei o pa puipui ma sela sela o fa'ata'ita'iga i le tele e mafai ai.Mo faʻataʻitaʻiga o laʻau o polyphenol polysaccharides, matou te fautuaina oe e te faʻaaogaina Plant Total RNA Isolation Kit Plus.
2. Aspirate le DNA-Cleaning Column isolated supernatant, aspirate le pellet otaota sela e mafai.
E mafai ona pupuni le pellet lapisi sela aspirated le RNA-na'o le Koluma i le taimi o le RNA adsorption taualumaga (silasila i le Laasaga 5 o le faʻatinoga, Laasaga 6 o le polysaccharide polyphenol procedure).Matou te fautua atu e tatau ona faʻaeteete pe a faʻaosoina lenei supernatant e aloese ai mai otaota sela e faʻafefe.
3. Ole aofaiga muamua ole fa'ata'ita'iga e tele tele.
O le tele o le fa'aogaina o fa'ata'ita'iga o le a i'u ai i le le atoatoa o fa'ata'ita'iga vaevaega po'o le le atoatoa o le lysis o sela e le Buffer PRL1 po'o le Buffer PSL1, ma i'u ai i se koluma fa'amamāina mo galuega fa'amamāina.La'au Aofa'i RNA Isolation Kit ei ai le maualuga muamua o le 50 mg i le fa'amamāina tasi o se fa'ata'ita'iga fa'atino.Mo faʻataʻitaʻiga o laʻau o polyphenol polysaccharides, matou te fautuaina oe e te faʻataʻitaʻi le Plant Total RNA Isolation Kit Plus.
4. O le vevela o le centrifuge e maualalo tele.
Ole RNA atoa ole fa'aesea ma le fa'amamāina se'i vagana ai le fa'alavelaveina o le nitrogen vai o le mea fa'ata'ita'i, o la'asaga uma e faia ile vevela ole potu (20-25 °C).O nisi centrifuges maualalo maualalo e iai le vevela i lalo ole 20 °C, lea e mafai ona mafua ai le poloka o le DNA-Cleaning Column ma/po'o le RNA-only Column.Afai e tupu lenei mea, seti le vevela centrifuge i le 20-25 °C ma muamua faʻamafanafana le paluga lysis ma/poʻo le faʻaopoopoina o le ethanol separation supernatant i le 37 °C.
Leai se RNA e maua mai pe RNA fua e maualalo
E masani ona tele mea e aʻafia ai le toe faʻaleleia lelei, e pei o le: faʻataʻitaʻiga RNA anotusi, metotia faʻagaioiga, le elution volume, ma isi.
Iloiloga o mafuaʻaga masani e pei o lalo:
1.O le taele aisa po o le maualalo o le vevela (4°C) centrifugation sa faia i le taimi o le taotoga.
Fautuaga: Faʻatino i le vevela o le potu (15-25 ° C) i le faagasologa atoa, aua le faia le taele aisa ma le centrifugation maualalo.
2.O le RNA ua faʻaleagaina ona o le le lelei o le faʻasaoina o le faʻataʻitaʻiga poʻo le faʻasaoina umi o le faʻataʻitaʻiga.
Fautuaga: E tatau ona vave fa'aaisa fa'ata'ita'iga fa'ato'a fa'ato'a fa'ato'a fa'aaisa i le vai, ona teu lea i le -80°C mo se taimi umi, aloese mai le fa'a'aisa fa'alua ma le fa'asao o fa'ata'ita'iga;pe fa'asusu vave fa'ata'ita'iga ile RNA stabilizer RNAlater solution (fa'ata'ita'iga manu).
3.Le lava fa'ata'ita'iga vaevaega ma lysis e ta'ita'ia ai le poloka o le koluma fa'amamaina.
Fautuaga: Pe a oloina le aano, faamolemole ia mautinoa o loʻo lava le palapala, ma vave faʻafeiloaʻi i le PSL1 Buffer na saunia muamua (faʻamaonia ua faʻaopoopoina le saʻo o le β-ME, vaʻai i le laasaga 1 o le faʻatinoga).
4. Ua le sa'o le fa'aopoopoina o le eluent.
Fautuaga: Ia mautinoa o le RNase-Free ddH2O lo'o fa'atete i le ogatotonu o le fa'amama koluma fa'amamāina.
5. E le'i fa'aopoopoina le voluma sa'o o le ethanol atoa ile Buffer PSL2 po'o le Buffer PRW2.
Fautuaga: Fa'amolemole mulimuli i fa'atonuga, fa'aopoopo le voluma sa'o o le ethanol atoatoa ile Buffer PSL2 ma le Buffer PRW2 ma fa'afefiloi lelei a'o le'i fa'aoga le pusa.
6.O le aofaʻi o faʻataʻitaʻiga o mea e le talafeagai.
Fautuaga: Fa'aaoga le 50 mg o mea'ai ile 500 μl ole Buffer PSL1.O le fa'aaogaina tele o aano o le a fa'aitiitia ai le aofa'i o le RNA e maua mai ma o le a fa'aitiitia fo'i le mama o le RNA e maua mai ai.Matou te fautuaina malosi e le tatau ona sili atu i le 50 mg le faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga i le faʻaogaina o le RNA.
7. Le le talafeagai o le elution volume po'o le le atoatoa o le elution.
Fautuaga: O le voluma eluent o le koluma faʻamamaina o le 50-200 μl;afai e le faamalieina le aafiaga o le elution, e fautuaina e faʻalautele le taimi i le vevela o le potu pe a uma ona faʻaopopo muamua RNase-Free ddH.2O, pei ole 5-10min.
8. O le fa'amamāina koluma ei ai le ethanol toega ina ua uma ona fufulu ma Buffer PRW2.
Fautuaga: Afai e centrifuged le paipa gaogao mo 1 min ma o loo i ai pea ethanol totoe pe a uma ona fufulu i Buffer PRW2, e mafai ona e faateleina le taimi o le centrifugation tube gaogao i 2 min, pe tuu le koluma faamamaina i le vevela o le potu mo le 5 min e aveese atoa le ethanol totoe.
9. Na fa'aaoga sese le pusa.
Fautuaga: Mo la'au fa'ata'ita'iga o polyphenolic polysaccharides, fa'aaoga pusa masani e pei ole Plant Total RNA Isolation Kit atonu e le mafai ona maua ni fa'ata'ita'iga RNA lelei.Matou te fautuaina oe e faʻaaoga le Plant Total RNA IsolationKit Plus, lea e faʻapitoa mo faʻataʻitaʻiga polyphenolic polysaccharide laau.O se pusa na fausia fa'apitoa mo le su'eina o le RNA mai fa'ata'ita'iga o la'au polyphenol ma polysaccharide.
OD260/OD280 tau maualalo
RNA elution ma ddH2O ma fa'aoga mo su'esu'ega o le spectrophotometer e maua ai le tau maualalo OD260/OD280.Matou te fautuaina le faʻaaogaina o le 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (nai lo le RNase-Free ddH2O e fa'asolo ai le RNA) ina ia maua sa'o lelei OD260/OD280, taga'i i le “RNA Concentration and Purification Assays” i le itulau 19.
O le RNA faʻamamaina ua faʻaleagaina
Ole tulaga lelei ole RNA fa'amamāina e feso'ota'i ma mea taua e pei ole fa'asaoina o fa'ata'ita'iga, fa'aleagaina o le RNase, ma le fa'aogaina.
Iloiloga o mafuaʻaga masani:
1. Tissue samples e leʻi teuina i le taimi pe a uma le aoina.
Fautuaga: Afai e le faʻaaogaina faʻataʻitaʻiga i le taimi pe a uma le aoina, faʻamolemole teu i totonu o le nitrogen vai i le maualalo o le vevela vave pe faʻafeiloaʻi i le -80 ° C mo se taimi umi e teu ai pe a maeʻa vave le malulu i le vai, pe faʻaofuina faʻataʻitaʻi i le RNA stabilizer RNAlater solution (faʻataʻitaʻiga manu).Mo le su'eina o le RNA, taumafai e fa'aoga fa'ata'ita'iga o mea'ai fou faatoa aoina.
2. Toe fa'a'aisa ma fa'afefeteina o fa'ata'ita'iga a le tino.
Fautuaga: Pe a teu ni fa'ata'ita'iga a le tino, e sili ona tipi i ni vaega laiti mo le fa'asaoina, ma ave i fafo se vaega pe a fa'aaogaina e aloese ai mai le fa'aleagaina o le RNA e mafua mai i le fa'a'aisa faifaipea ma le liusua o fa'ata'ita'iga.
3. RNase e faʻafeiloaʻi i totonu o le potu taʻavale poʻo le le ofuina o totigilima, matapulepule, ma isi.
Fautuaga: E sili ona lelei le faia o faʻataʻitaʻiga o le RNA i gaioiga eseese o le RNA, ma e tatau ona faʻamama le laulau suʻesuʻe aʻo leʻi faia le suʻega, ma e tatau ona ofuina totigilima ma matapulepule i le taimi o le suʻega e aloese ai mai le faʻaleagaina o le RNA e mafua mai i le faʻaofiina o le RNase i le tele.
4.O le reagent e faʻaleagaina e RNase i le taimi o faʻaoga.
Fautuaga: Sui i se fa'asologa fou o pusa fa'ato'a fa'atosina RNA mo su'ega fa'atatau.
5. The centrifuge tubes ma pipette tips faʻaaogaina mo le faʻaogaina o le RNA ua faʻaleagaina i le RNase.
Fautuaga: Ia mautinoa o paipa centrifuge, faʻamatalaga paipa, paipa, ma isi mea faʻaaoga i le RNA faʻapipiʻiina o RNase-Free uma.
Tusi Taiala:
