Pusa Ave'esega o le Gel DNA Pusa Ave'esega
Fa'amatalaga o pusa:
Fa'atopetope ma toe fa'aolaina 20bp-10kb vaega DNA mai le gel agarose.
◮Ole tele ole DNA toe fa'aleleia:E mafai ona toe maua mai fasi vaega DNA e puupuu e pei o le 30bp ma le lapopoa e pei o le 10kb.
◮maualuga le toe fa'aleleia lelei:Ole maualuga ole toe fa'aleleia lelei e mafai ona o'o atu ile 80%.
◮Laiti faiga elution:e le itiiti ifo 30μl elution fofo e mafai ona faaaogaina mo elution, lea e mafai ona faateleina lelei le concentration o toe maua vaega DNA.
◮Saosaoa vave:Fa'afaigofie ona fa'agaioia, e mafai ona fa'amae'a le toe fa'aleleia o fasi vaega DNA i totonu ole 15 minute.
◮Saogalemu:E le mana'omia le su'eina o reagent.
◮Tulaga maualuga:O vaevaega DNA toe maua e maualuga le mama, lea e mafai ona fetaui ma isi suʻega mulimuli ane.
Fa'amatalaga
O lenei pusa o loʻo faʻaaogaina le koluma vili ma fua faʻatatau e fausia e la matou kamupani, lea e mafai ona toe faʻaleleia lelei vaega DNA mama mai le agarose gel.E mafai e le pusa ona toe faʻaleleia vaega o DNA i se lautele lautele.I lalo o tulaga masani, o vaega DNA o le 30bp-10kb e mafai ona toe maua.Ole laʻititi ole 30μl ole eluent e mafai ona faʻaogaina e faʻateleina ai le faʻaogaina ole DNA toe maua.
O le pusa e faigofie ona faʻaogaina ma e itiiti ni laasaga.E na'o le tele o centrifugation e mana'omia e fa'agasolo ai le tele o fa'ata'ita'iga i le taimi e tasi, ma e mafai ona maua mai i totonu ole 15 minute le mama-maa'i toe maua mai.
Fa'amatalaga
50 Sauniuniga
Buffer GE: Fa'amama le poloka gel ile 60°C e fa'asa'oloto ai vaega DNA mai le gel.
Puipui WB1: Ave'ese iona masima o totoe i le DNA.
Buffer EB: faʻafefe le DNA i luga o le faʻamama o le koluma faʻamamaina.
DNA-Na'o le Koluma: Fa'apipi'i fa'apitoa o vaega DNA i le gel.
Vaega o pusa
| Pa'u GE* |
| Puipui WB1 |
| Puipui EB |
| DNA-Na'o Koluma |
| Faatonuga |
Fa'apitoa & itu lelei
-O le lautele o le toe faʻaleleia o DNA: O vaega o le DNA e puupuu e pei o le 30bp ma le tele e pei o le 10kb e mafai ona toe maua.
-O le maualuga o le toe faʻaleleia lelei: O le maualuga o le toe faʻaleleia lelei e mafai ona oʻo atu i le 80%.
-Laiti faiga elution: e le itiiti ifo i le 30μl elution fofo e mafai ona faaaogaina mo elution, lea e mafai ona faʻaleleia lelei le faʻaogaina o vaega DNA toe maua.
-Saosaoa vave: Faʻafaigofie ona faʻaogaina, toe faʻaleleia le DNA e mafai ona maeʻa i totonu ole 15 minute.
-Saogalemu: E le mana'omia se su'ega reagent.
- Tulaga maualuga: O vaevaega DNA toe maua e maualuga le mama, lea e mafai ona fetaui ma isi suʻega mulimuli ane.
Fa'aoga pusa
O lenei pusa e talafeagai mo le toe faʻaleleia o vaega DNA (30bp-10kb) i gels agarose.
Fa'asologa o galuega
Teuina ma le ola fa'asao
O lenei pusa e mafai ona teuina mo le 12 masina i lalo o tulaga mago i le vevela o le potu (15-25 ° C), afai e manaʻomia ona teuina mo se taimi umi, e mafai ona teuina i le 2-8 ° C.
Fa'aaliga: Afai e teu ile vevela maualalo, ole vaifofo e faigofie ile timu.Aʻo leʻi faʻaaogaina, ia mautinoa e tuʻu le vaifofo i totonu o le pusa i le vevela o le potu mo se vaitaimi.Afai e mana'omia, mua'i fa'avevela i totonu o le vai taele 37°C mo le 10 minute e fa'amuta ai le sua, ma fa'afefiloi a'o le'i fa'aaogaina.
