Suavai DNA Tu'uesea Pusa DNA Aveesea ma Fa'amamāina mo Suavai
Fa'amatalaga o pusa:
Fa'amama vave le DNA genomic maualuga mai meaola ninii i vai fa'ata'ita'iga eseese.
◮Leai se fa'aleaga RNase:Ole DNA-Only Column na saunia e le pusa e mafai ai ona aveese le RNA mai le genomic DNA e aunoa ma le faʻaopoopoina o le RNase i le taimi o le suʻega, e puipuia ai le falesuesue mai le faʻaleagaina e le RNase ese.
◮Saosaoa vave:O le Foregene Protease e sili atu lona gaioioiga nai lo mea fa'apena fa'apena, ma fa'ato'a eliina fa'ata'ita'iga a le tino;e faigofie le taotoga, ma e mafai ona maeʻa le faʻaogaina o le DNA genomic i totonu ole 20-80 minute.
◮Faigofie:O le centrifugation e faia i le vevela o le potu, ma e leai se manaʻoga mo le 4 ° C maualalo le vevela centrifugation poʻo le ethanol precipitation o DNA.
◮Saogalemu:E le mana'omia le su'eina o reagent.
◮Tulaga maualuga:O le DNA genomic ua maua mai o loʻo i ai ni vaega tetele, leai se RNA, leai se RNase, ma e matua maualalo le ion content, lea e mafai ona fetaui ma manaʻoga o suʻega eseese.
◮Micro-elution faiga:E mafai ona faʻateleina le faʻaogaina o DNA genomic, lea e faigofie mo suʻesuʻega i lalo poʻo le faʻataʻitaʻiga.
Fa'amatalaga
50 Sauniuniga
-Lysozyme: enzymatically hydrolyse le puipui sela o siama lelei.
-Buffer TE: faʻaaoga e saunia 100mg / ml Lysozyme fofo ma tuʻuina atu lysozyme enzymatic hydrolysis siosiomaga.
-Buffer SG1 & Buffer SG2: Tuuina atu faʻataʻitaʻiga protease digestion siosiomaga.
-Foregene Protease: Enzymatically hydrolyze faʻataʻitaʻiga i totonu o se siʻosiʻomaga enzymatic protease e faʻasaʻo ai DNA genomic.
-Buffer SG3: Inactivate Foregene Protease ma saunia se siosiomaga faʻapipiʻi DNA.
-Buffer SG4: Fa'aopoopo e maua ai le si'osi'omaga o uta DNA.
-Buffer PW: Aveese mea leaga e pei ole polotini ma le RNA ile DNA.
-Buffer WB: Ave'ese iona masima o totoe i le DNA.
-Buffer EB: elute le DNA i luga o le fa'amama koluma fa'amama.
-DNA-na'o le Koluma: fa'apipi'i fa'apitoa le DNA genomic i le lysate.
Vaega o pusa
| Puipui SG1 |
| Puipui SG2 |
| Puipui SG3 |
| Puipui SG4 |
| Puipui PW |
| Puipui WB |
| Puipui EB |
| Puipui TE |
| Foregene Protease |
| Lysozyme |
| DNA-Na'o Koluma |
| Faatonuga |
Fa'apitoa & itu lelei
-Leai se RNase fa'aleagaina: O le DNA-Na'o le Koluma na tu'uina atu e le pusa e mafai ai ona aveese le RNA mai le genomic DNA e aunoa ma le fa'aopoopoina o le RNase i le taimi o le fa'ata'ita'iga, aloese mai le falesu'esu'e mai le fa'aleagaina e le RNase mai fafo.
-Saosaoa vave: E faigofie le taʻaloga, ma e mafai ona maeʻa le suʻeina o le DNA genomic vai i totonu ole 40 minute.
-Tagata: O le centrifugation e faia i le vevela o le potu, ma e leai se manaʻoga mo le 4 ° C maualalo le vevela centrifugation poʻo le ethanol precipitation o DNA.
-Saogalemu: e le manaʻomia le faʻaogaina o reagent.
- Tulaga maualuga: O vaega o le DNA genomic ua maua mai e lapopoa, e leai se RNA, leai se RNase, ma e matua maualalo lava le ion content, lea e mafai ona ausia manaʻoga o suʻega eseese.
Fa'aoga pusa
E talafeagai mo le faʻamamaina o le DNA genomic o faʻataʻitaʻiga nei: vai vaituloto vaituloto, vai vaituloto, vai paipa, vai vaituloto, vai vaitafe, vai vaituloto lotus ma isi faʻataʻitaʻiga.
Fa'asologa o galuega
Teuina ma le ola fa'asao
-O lenei pusa e mafai ona teuina mo le 12 masina i lalo o tulaga mago i le vevela o le potu (15-25 ° C), afai e manaʻomia ona teuina mo se taimi umi, e mafai ona teuina i le 2-8 ° C.
Fa'aaliga: Afai e teu ile vevela maualalo, ole vaifofo e faigofie ile timu.Aʻo leʻi faʻaaogaina, ia mautinoa e tuʻu le vaifofo i totonu o le pusa i le vevela o le potu mo se vaitaimi.Afai e mana'omia, mua'i fa'avevela ile 37°C vai taele mo le 10 minute e faʻamavae ai le sua, ma faʻafefiloi aʻo leʻi faʻaaogaina.
-Foregene Protease solution o loʻo i ai se fua faʻapitoa, lea e galue pe a teuina i le vevela o le potu mo se taimi umi (3 masina);pe a teuina i le 4 ℃, o lona gaioiga ma le mautu o le a sili atu, o lea e fautuaina ai e teu i le 4 ℃, manatua e aua le teuina i le -20 ℃.
-O le pauta mago Lysozyme o lo'o teuina ile -20°C;o le fofo saunia Lysozyme ua vaevaeina i ni vaega laiti ma teuina i le -20 ° C.
