Pusa Fa'ato'esega DNA La'au Genomic La'au Fa'amamāina DNA Pusa Reagents Protocol
Fa'amatalaga
50 Sauniuniga, 100 Sauniuniga, 250 Sauniuniga
O lenei pusa o loʻo faʻaaogaina se DNA-naʻo le koluma e mafai ona faʻapipiʻi faʻapitoa le DNA, Foregene protease ma se faiga faʻapipiʻi tulaga ese, lea e matua faafaigofieina ai le faʻamamaina o le DNA genomic laau.Ole DNA genomic maualuga e mafai ona maua i totonu ole 30 minute, e aloese ai mai le faʻaleagaina ole DNA genomic.
Ole DNA-na'o le silica gel membrane o loʻo faʻaaogaina i le koluma vili o se mea fou tulaga ese a Foregene, lea e mafai ona faʻamaonia lelei ma faʻapitoa i DNA, ma faʻateleina le aveesea o le RNA, palatini le mama, ion, polysaccharides, polyphenols ma isi mea faʻalaʻau.
Vaega o oloa
| Puipui PL1, Puipui PL2 |
| Puipui PW, Puipui WB, Puipui EB |
| Foregene Protease |
| DNA-Na'o Koluma |
| Faatonuga |
Fa'apitoa & itu lelei
■ Leai se RNase fa'aleagaina: O le DNA-Na'o le Koluma o lo'o tu'uina mai e le pusa e mafai ai ona aveese le RNA mai le genomic DNA e aunoa ma le fa'aopoopoina o le RNase i le taimi o le su'ega, e puipuia ai le falesu'esu'e mai le afaina i le RNase mai fafo.
■ Saosaoa vave: Foregene Protease e sili atu lona gaioioiga nai lo protease tutusa ma fa'ato'a fa'atosinaina fa'ata'ita'iga a le tino.
■ Faigofie: e mafai ona maeʻa le faʻaogaina o le DNA genomic i le 30 minute.
■ Faigofie: O le centrifugation e faia i le vevela o le potu, e le manaʻomia le 4 ℃ centrifugation maualalo-vevela poʻo le ethanol precipitation o DNA.
■ Saogalemu: e le mana'omia se reagent.
■ Tulaga maualuga: O le DNA genomic faʻamamaina o loʻo i ai ni vaega tetele, leai se RNA, leai se RNase, ma le maualalo o le ion content, e mafai ona ausia manaʻoga o suʻega eseese.
Fa'aoga pusa
E talafeagai mo le fa'amama ma le fa'amamāina o le genomic DNA mai aano o la'au fou pe fa'aisa.
Fa'agasologa o galuega
Ata
Teuina ma le ola fa'asao
E mafai ona teu le pusa mo le 12 masina i le vevela o le potu (15-25 ℃) ma le 2–8 ℃ mo se taimi umi.
Foregene Protease Plus solution ei ai se fua fa'atatau, e fa'agaoioia pe a teuina i le vevela o le potu mo se taimi umi (3 masina);o lona gaioiga ma le mautu o le a sili atu pe a teuina i4 ℃, o lea e fautuaina ai e teu i le 4 ℃, manatua e aua le teuina ile -20 ℃.
Taiala Iloiloga o Faafitauli
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
E maualalo fua pe leai se DNA
E masani ona tele mea e aʻafia ai le gaosiga o le genomic DNA, e aofia ai le puna o le faʻataʻitaʻiga, le matua o le faʻataʻitaʻiga, tulaga teuina o le faʻataʻitaʻiga, ma le taotoga.
Genomic DNA e le'i mafai ona maua i le taimi o le aveeseina
1. O faʻataʻitaʻiga o meaʻai e le lelei ona teuina pe teuina mo se taimi umi, e mafua ai le faʻaleagaina o le DNA genomic.
Fautuaga: Teu fa'ata'ita'iga o mea'ai i totonu o le vai po'o le -20°C;taumafai e fa'aoga fa'ata'ita'iga fou na aoina mo le su'ega DNA genomic.
2. O le laititi o le aofa'i o fa'ata'ita'iga e ono mafua ai ona le maua mai le DNA genomic tutusa.
Fautuaga: Mo fa'ata'ita'iga o mea'ai sa teuina mo se taimi umi po'o ua matua'i fa'aleagaina DNA genomic, e mafai ona fa'aopoopoina le aofa'i o fa'ata'ita'iga a le tino ina ia maua mai ai le DNA genomic tele.Ole aofaʻi ole faʻataʻitaʻiga e mafai ona fuafua e tusa ai ma manaʻoga DNA, ae o le faʻataʻitaʻiga fou e le tatau ona sili atu i le 100mg, ma le faʻamago faʻataʻitaʻiga e le tatau ona sili atu i le 30mg.
3. O le fa'ata'ita'iga e le'o fa'afefeteina i le vai fa'asusu pe tu'u mo se taimi umi pe a mae'a le vai.
Fautuaga: I le taimi o le su'eina o le DNA, e mana'omia le fa'a'ele'ele atoatoa o le fa'ata'ita'iga i le vai o le nitrogen e ta'e ai le puipui sela;pe a uma ona olo, faʻamolemole faʻafeiloaʻi le faʻataʻitaʻiga o le paʻu i le PL1 muaʻi vevela ile 65°C i se taimi vave e mafai ai (o le taimi lava e liusua ai le paʻu o le eleele, o le DNA genomic o le a amata vave ona faʻaleagaina) .
4. Le teuina lelei o le Foregene Protease e i'u ai i le fa'aitiitia po'o le le toe fa'aaogaina.
Fautuaga: Fa'amautu tulaga e teu ai le Foregene Protease pe sui i se Foregene Protease fou mo le enzymatic hydrolysis.
5. O le pusa e le lelei ona teuina pe teuina mo se taimi umi, ma mafua ai ona faaletonu nisi vaega o le pusa.
Fautuaga: Fa'atau se pusa fou mo le su'eina o le DNA genomic mo galuega fa'atatau.
6. Le fa'aoga tatau o le pusa.
Fautuaga: Fa'atau se Pusa Fa'ato'esega DNA La'au fa'apitoa mo fa'ata'ita'iga mo le fa'amama ma fa'amamāina ole DNA genomic la'au.
7. Taofi le WB e aunoa ma le faaopoopo afa'asusu ethanol.
Fautuaga: Ia mautinoa e faʻaopoopo le voluma saʻo o le ethanol atoatoa ile Buffer WB.
8. E le'i fa'asa'o sa'o le eluent i luga o le pa'u silica.
Fautuaga: Fa'aopoopo le eluent na mua'i fa'avevela ile 65℃pa'ū i le ogatotonu o le silica gel membrane, ma tuʻu i le vevela o le potu mo le 5 minute e faʻateleina ai le lelei o le elution.
Aveese ina ia maua ai le DNA genomic maualalo
1. O le faʻataʻitaʻiga e le lelei ona teuina pe teuina mo se taimi umi, e mafua ai le faʻaleagaina o le genomic DNA.
Fautuaga: Teu ni fa'ata'ita'iga a le tino i le -20℃;taumafai e fa'aoga ni fa'ata'ita'iga o a'afiaga fou na aoina mo le su'ega DNA genomic.
2. Afai e laʻititi tele le aofaʻi o faʻataʻitaʻiga a le tino, o le DNA genomic o le a faʻaitiitia.
Fautuaga: O nisi o la'au fa'ata'ita'iga e mauoa i le vai, e pei o la'au vai e pei o algae, ma isi, e mafai ona fa'asili lelei le fua pe fa'amama le vai a'o le'i faia le taotoga.
3. O fa'ata'ita'iga e le'i fa'a'ele'ele'ele'elea i le vai fa'asusu pe tu'u i le vevela o le potu mo se taimi umi pe a uma ona olo.
Fautuaga: E tatau ona lava le oloina o le nitrogen vai, ma e tatau ona malepe le puipui o le cell sample i le tele e mafai ai;i le taimi lava e maeʻa ai le olo, e tatau ona faʻafeiloaʻi le paʻu faʻataʻitaʻiga i le 65℃mua'i fa'avevela Buffer PL1 mo le isi la'asaga.
4. Le fa'aogaina le pusa sa'o.
Fautuaga: Fa'aaogā se Pusa Fa'ato'esega DNA La'au e fa'amama ma fa'amama le DNA genomic laau.
5. Le teuina lelei o le Foregene Protease e i'u ai i le fa'aitiitia po'o le le toe fa'aaogaina.
Fautuaga: Fa'amautu tulaga e teu ai le Foregene Protease pe sui i se Foregene Protease fou mo le enzymatic hydrolysis.
6. Fa'afitauli manino
Fautuaga: Fa'amolemole fa'aaoga le Buffer EB mo le fa'amalamalamaga;pe a fa'aaoga le ddH2O po'o isi eluent, ia mautinoa o le pH o le eluent o lo'o i le va o le 7.0-8.5.
7. E le o sa'o le su'eina o le eluent
Fautuaga: Fa'amolemole fa'aopoopo le pa'u elution i le ogatotonu o le pa'u silica ma tu'u i le vevela o le potu mo le 5 minute e fa'ateleina ai le lelei o le elution.
8. O le voluma eluent e la'ititi tele
Fautuaga: Fa'amolemole fa'aaoga le eluent mo genomic DNA elution e tusa ai ma fa'atonuga, ia le itiiti ifo i le 100μl.
Ave'esea genomic DNA ma maualalo mama
O le maualalo o le mama o le genomic DNA o le a taʻitaʻia ai le toilalo poʻo le leaga o aʻafiaga o faʻataʻitaʻiga i lalo, e pei o le: e le mafai ona tipi le enzyme, ma e le mafai ona maua e le PCR le vaega o le kenera.
1. Fa'aleaga palatini eseese, fa'aleagaina RNA.
Iloiloga: Buffer PW e leʻi faʻaaogaina e fufulu ai le koluma;E le'i fa'aogaina le Buffer PW e fufulu ai le koluma i le saosaoa o le centrifugation.
Fautuaga: taumafai ia mautinoa e leai se timu i totonu o le supernatant pe a pasia le supernatant i le koluma;ia mautinoa e fufulu le koluma faʻamamaina ma le Buffer PW e tusa ai ma faʻatonuga, ma e le mafai ona faʻaumatia lenei laasaga.
2. Fa'aleagaina ion le mama.
Au'ili'iliga: O le koluma fa'amama WB na fa'ate'aina pe na'o na'o le tasi fo'i na fufulu, ma i'u ai i le fa'aleagaina o le ionic.
Fautuaga: Ia mautinoa e fufulu faalua i le Buffer WB e tusa ai ma faatonuga e aveese ai ion o totoe i le tele e mafai ai.
3. RNase fa'aleagaina.
Iloiloga: E faʻaopoopo le RNase Exogenous i le Buffer;le sa'o le fufuluina i totonu o le Buffer PW o le a maua ai le RNase o totoe ma a'afia ai fa'ata'ita'iga fa'ata'ita'iga o le RNA, e pei o le fa'aliliuga in vitro.
Fautuaga: Foregene series nucleic acid extraction kits e mafai ona aveese le RNA e aunoa ma se RNase faaopoopo, ma e le manaʻomia e le Reagents uma i le Plant DNA Isolation Kit le RNase;ia mautinoa e fufulu le koluma faʻamamaina ma le Buffer PW e tusa ai ma faʻatonuga, ma e le mafai ona faʻaumatia lenei laasaga.
4. Ethanol toega.
Iloiloga: Ina ua uma ona fufuluina le koluma faʻamamāina i le Buffer WB, e leai se faʻaogaina o le faʻaogaina o paipa na faia.
Fautuaga: Mulimuli i fa'atonuga mo le centrifugation faagaau gaogao talafeagai.
Tusi Taiala:
La'au DNA Tu'u'ese'ese Tusi Fa'atonuga
