Foreasy Taq DNA Polymerase
Fa'amatalaga
Foreasy Taq DNA Polymerase ose Taq enzyme fou o lo'o fa'aalia i siama fa'ainisinia Escherichia coli e ala ile tekonolosi toe tu'ufa'atasia.O le enzyme lava ia ei ai se gaioiga vevela-amata ma e mafai ona faʻaaogaina mo PCR masani ma qPCR;o lo'o i ai le 5'→3' DNA polymerase activity ma le 5'→3' exonuclease activity, ae leai se 3'→5' exonuclease activity.
Vaega o pusa
Vaega | IM-01011 | IM-01012 | IM-01013 |
Foreasy Taq DNA Polymerase(5 U/μL) | 5000 U (1 mL) | 50 KU (10 mL) | 500 KU (100 mL) |
2× Taq Reaction Buffer | 25 mL ×5 | 250 mL ×5 | 500 mL ×25 |
Fa'apitoa & itu lelei
- Tulaga maualuga: O le enzyme ei ai se gaioiga vevela-amata.
- Fa'atele vave: 10 sec/kb .
- Fa'ata'ita'iga sili ona fetuutuuna'i: e mafai ona fa'aoga e fa'asili lelei ai le GC Fa'atauga maualuga, eseese fa'ata'ita'iga DNA faigata-fa'ateleina.
- Malosi fa'amaoni: masani Taq Enzyme 6 taimi.
- Malosi o le vevela: E mafai ona tuʻu i le 37 °C mo le vaiaso ma faʻatumauina le sili atu i le 90% gaioiga.
Fa'aoga pusa
Eseese PCR/qPCR faiga ma faiga PCR tuusao
PCR faʻalauteleina o vaega DNA
Fa'ailoga DNA
DNA fa'asologa
PCR A-si'usi'u
U Uiga
1U: Ole aofa'i ole enzyme e mana'omia e tu'u ai le 10 nmol o deoxynucleotides ile mea e le mafai ona fa'asalaina ile fa'aogaina ole DNA sperm sperm fa'agaoioia e fai ma fa'ata'ita'iga/primer mo le 30 minute ile 74°C.
Tulaga Tali
vevela | Taimi | Ta'amilosaga |
37°C | 5min | 1 |
94°C | 5min | 1 |
94°C | 10 Sec | 35 |
60°C | 10 Sec | |
72°C | 20 sec/kb | |
72°C | 2min | 1 |
Teuina
-20 ± 5 °C mo le 2 tausaga poʻo le -80 °C mo le teuina umi.
Leai ni fa'ailoga fa'ateleina
1. O le Taq DNA Polymerase i totonu o le pusa e leiloa lana gaioiga ona o le le lelei o le teuina poʻo le maeʻa o le pusa.
Fautuaga: Faʻamaonia tulaga e teu ai le pusa;toe fa'aopoopo se aofa'iga talafeagai o le Taq DNA Polymerase i le PCR system pe fa'atau se Pusa PCR Taimi Moni mo su'esu'ega fa'atatau.
2.O loʻo i ai le tele o le inhibitors o le Taq DNA Polymerase i le DNA template.
Fautuaga: Toe fa'amama le fa'ata'ita'iga pe fa'aitiitia le aofa'i o fa'ata'ita'iga na fa'aaogaina.
3.E le talafeagai le faʻaogaina o le Mg2 +.
Fautuaga: O le Mg2+ fa'atonuga o le2x Real PCR Mix matou te tu'uina atu o le 3.5mM.Ae ui i lea, mo nisi faʻamatalaga faʻapitoa ma faʻataʻitaʻiga, atonu e maualuga atu le faʻaogaina o le Mg2+.O le mea lea, e mafai ona e faʻaopoopo saʻo MgCl2 e faʻamalieina ai le faʻaogaina o le Mg2+.E fautuaina e faʻateleina le Mg2 + 0.5mM i taimi taʻitasi mo le faʻaleleia.
4.E le talafeagai tulaga faʻalauteleina PCR, ma le faʻasologa muamua poʻo le faʻatonuga e le talafeagai.
Fautuaga: fa'amaonia le sa'o o le fa'asologa muamua ma le fa'amuamua e le'i fa'aleagaina;afai e le lelei le faailo o le faʻalauteleina, taumafai e faʻaititia le vevela o le faʻamaʻi ma fetuutuunai le faʻaogaina o mea muamua.
5.O le aofaʻi o faʻataʻitaʻiga e laʻititi pe tele naua.
Fautuaga: Fa'atino fa'ata'ita'iga fa'aliga fa'alili fa'alili, ma filifili le fa'ata'ita'iga fa'atonuga fa'atasi ai ma le fa'aoga lelei o le PCR mo le su'ega PCR Taimi Moni.
Ole NTC e maualuga tele le tau ole fluorescence
1. Reagent contamination mafua i le taimi o le taotoga.
Fautuaga: Sui i reagents fou mo su'ega PCR Taimi Moni.
2. Faʻaleagaina na tupu i le taimi o le sauniuniga o le PCR reaction system.
Fautuaga: Fai ni puipuiga talafeagai i le taimi o le taotoga, e pei o le: ofuina o totigilima latex, faʻaogaina o le pito paipa ma se faamama, ma isi.
3. E faʻaleagaina le faʻauluuluga, ma o le faʻaleagaina o mea muamua o le a mafua ai le faʻalauteleina o le le faʻapitoa.
Fautuaga: Fa'aaoga le SDS-PAGE electrophoresis e iloa ai pe fa'aleagaina ia mea muamua, ma sui i fa'amatalaga fou mo su'ega PCR Taimi Moni.
Primer dimer po'o le fa'alauteleina e le fa'apitoa
1.E le talafeagai le faʻaogaina o le Mg2 +.
Fautuaga: O le faʻaogaina o le Mg2 + o le 2 × Real PCR EasyTM Mix matou te tuʻuina atu o le 3.5 mM.Ae ui i lea, mo nisi faʻamatalaga faʻapitoa ma faʻataʻitaʻiga, atonu e maualuga atu le faʻaogaina o le Mg2+.O le mea lea, e mafai ona e faʻaopoopo saʻo MgCl2 e faʻamalieina ai le faʻaogaina o le Mg2+.E fautuaina e faʻateleina le Mg2 + 0.5mM i taimi taʻitasi mo le faʻaleleia.
2.O le PCR annealing vevela e maualalo tele.
Fautuaga: Fa'ateleina le vevela o le PCR i le 1 ℃ po'o le 2 ℃ i taimi ta'itasi.
3. O le PCR oloa e umi tele.
Fautuaga: Ole umi ole oloa ole PCR Taimi Moni e tatau ile va ole 100-150bp, e le sili atu ile 500bp.
4. E faʻaleagaina le faʻauluuluga, ma o le faʻaleagaina o mea muamua o le a taʻitaʻia ai le faʻaalia o le faʻaopoopoga faʻapitoa.
Fautuaga: Fa'aaoga le SDS-PAGE electrophoresis e iloa ai pe fa'aleagaina ia mea muamua, ma sui i fa'amatalaga fou mo su'ega PCR Taimi Moni.
5.O le PCR faiga e le talafeagai, poʻo le faiga e laʻititi tele.
Fautuaga: O le PCR reaction system e la'ititi tele e mafua ai ona fa'aitiitia le sa'o sa'o.E sili ona lelei le fa'aogaina o le faiga fa'afoliga o lo'o fautuaina mai e le mea faigaluega PCR quantitative e toe fa'atino ai le su'ega PCR Taimi Moni.
Le lelei le toe faia o tau fa'atusa
1. Ua faaletonu le meafaigaluega.
Fautuaga: E ono iai ni mea sese i le va o pu PCR taʻitasi o le meafaigaluega, e mafua ai le le lelei o le toe gaosia i le taimi o le puleaina o le vevela poʻo le suʻeina.Fa'amolemole siaki e tusa ai ma fa'atonuga a le meafaigaluega talafeagai.
2.E le lelei le faʻataʻitaʻiga mama.
Fautuaga: O faʻataʻitaʻiga le mama o le a taʻitaʻia ai le le lelei o le toe gaosia o le suʻega, lea e aofia ai le mama o le faʻataʻitaʻiga ma mea muamua.E sili ona lelei le toe faʻamamāina o le faʻataʻitaʻiga, ma o mea muamua e sili ona faʻamamaina e le SDS-PAGE.
3.O le sauniuniga o le PCR ma le teuina o taimi e umi tele.
Fautuaga: Fa'aoga le polokalama PCR Taimi Moni mo le fa'ata'ita'iga PCR i le taimi lava e uma ai tapenaga, ma 'aua le tu'u 'ese mo se taimi umi.
4.E le talafeagai tulaga faʻalauteleina PCR, ma le faʻasologa muamua poʻo le faʻatonuga e le talafeagai.
Fautuaga: fa'amaonia le sa'o o le fa'asologa muamua ma le fa'amuamua e le'i fa'aleagaina;afai e le lelei le faailo o le faʻalauteleina, taumafai e faʻaititia le vevela o le faʻamaʻi ma fetuutuunai le faʻaogaina o mea muamua.
5.O le PCR faiga e le talafeagai, poʻo le faiga e laʻititi tele.
Fautuaga: O le PCR reaction system e la'ititi tele e mafua ai ona fa'aitiitia le sa'o sa'o.E sili ona lelei le fa'aogaina o le faiga fa'afoliga o lo'o fautuaina mai e le mea faigaluega PCR quantitative e toe fa'atino ai le su'ega PCR Taimi Moni.