Leai ni fa'ailoga fa'ateleina

1. O le Taq DNA Polymerase i totonu o le pusa e leiloa lana gaioiga ona o le le lelei o le teuina poʻo le maeʻa o le pusa.
Fautuaga: Faʻamaonia tulaga e teu ai le pusa;toe fa'aopoopo se aofa'iga talafeagai o le Taq DNA Polymerase i le PCR system pe fa'atau se Pusa PCR Taimi Moni mo su'esu'ega fa'atatau.

2.O loʻo i ai le tele o le inhibitors o le Taq DNA Polymerase i le DNA template.
Fautuaga: Toe fa'amama le fa'ata'ita'iga pe fa'aitiitia le aofa'i o fa'ata'ita'iga na fa'aaogaina.

3.E le talafeagai le faʻaogaina o le Mg2 +.
Fautuaga: O le Mg2+ fa'atonuga o le2x Real PCR Mix matou te tu'uina atu o le 3.5mM.Ae ui i lea, mo nisi faʻamatalaga faʻapitoa ma faʻataʻitaʻiga, atonu e maualuga atu le faʻaogaina o le Mg2+.O le mea lea, e mafai ona e faʻaopoopo saʻo MgCl2 e faʻamalieina ai le faʻaogaina o le Mg2+.E fautuaina e faʻateleina le Mg2 + 0.5mM i taimi taʻitasi mo le faʻaleleia.

4.E le talafeagai tulaga faʻalauteleina PCR, ma le faʻasologa muamua poʻo le faʻatonuga e le talafeagai.
Fautuaga: fa'amaonia le sa'o o le fa'asologa muamua ma le fa'amuamua e le'i fa'aleagaina;afai e le lelei le faailo o le faʻalauteleina, taumafai e faʻaititia le vevela o le faʻamaʻi ma fetuutuunai le faʻaogaina o mea muamua.

5.O le aofaʻi o faʻataʻitaʻiga e laʻititi pe tele naua.
Fautuaga: Fa'atino fa'ata'ita'iga fa'aliga fa'alili fa'alili, ma filifili le fa'ata'ita'iga fa'atonuga fa'atasi ai ma le fa'aoga lelei o le PCR mo le su'ega PCR Taimi Moni.

Ole NTC e maualuga tele le tau ole fluorescence

1. Reagent contamination mafua i le taimi o le taotoga.
Fautuaga: Sui i reagents fou mo su'ega PCR Taimi Moni.

2. Faʻaleagaina na tupu i le taimi o le sauniuniga o le PCR reaction system.
Fautuaga: Fai ni puipuiga talafeagai i le taimi o le taotoga, e pei o le: ofuina o totigilima latex, faʻaogaina o le pito paipa ma se faamama, ma isi.

3. E faʻaleagaina le faʻauluuluga, ma o le faʻaleagaina o mea muamua o le a mafua ai le faʻalauteleina o le le faʻapitoa.
Fautuaga: Fa'aaoga le SDS-PAGE electrophoresis e iloa ai pe fa'aleagaina ia mea muamua, ma sui i fa'amatalaga fou mo su'ega PCR Taimi Moni.

Primer dimer po'o le fa'alauteleina e le fa'apitoa

1.E le talafeagai le faʻaogaina o le Mg2 +.
Fautuaga: O le faʻaogaina o le Mg2 + o le 2 × Real PCR EasyTM Mix matou te tuʻuina atu o le 3.5 mM.Ae ui i lea, mo nisi faʻamatalaga faʻapitoa ma faʻataʻitaʻiga, atonu e maualuga atu le faʻaogaina o le Mg2+.O le mea lea, e mafai ona e faʻaopoopo saʻo MgCl2 e faʻamalieina ai le faʻaogaina o le Mg2+.E fautuaina e faʻateleina le Mg2 + 0.5mM i taimi taʻitasi mo le faʻaleleia.

2.O le PCR annealing vevela e maualalo tele.
Fautuaga: Fa'ateleina le vevela o le PCR i le 1 ℃ po'o le 2 ℃ i taimi ta'itasi.

3. O le PCR oloa e umi tele.
Fautuaga: Ole umi ole oloa ole PCR Taimi Moni e tatau ile va ole 100-150bp, e le sili atu ile 500bp.

4. E faʻaleagaina le faʻauluuluga, ma o le faʻaleagaina o mea muamua o le a taʻitaʻia ai le faʻaalia o le faʻaopoopoga faʻapitoa.
Fautuaga: Fa'aaoga le SDS-PAGE electrophoresis e iloa ai pe fa'aleagaina ia mea muamua, ma sui i fa'amatalaga fou mo su'ega PCR Taimi Moni.

5.O le PCR faiga e le talafeagai, poʻo le faiga e laʻititi tele.
Fautuaga: O le PCR reaction system e la'ititi tele e mafua ai ona fa'aitiitia le sa'o sa'o.E sili ona lelei le fa'aogaina o le faiga fa'afoliga o lo'o fautuaina mai e le mea faigaluega PCR quantitative e toe fa'atino ai le su'ega PCR Taimi Moni.

Le lelei le toe faia o tau fa'atusa

1. Ua faaletonu le meafaigaluega.
Fautuaga: E ono iai ni mea sese i le va o pu PCR taʻitasi o le meafaigaluega, e mafua ai le le lelei o le toe gaosia i le taimi o le puleaina o le vevela poʻo le suʻeina.Fa'amolemole siaki e tusa ai ma fa'atonuga a le meafaigaluega talafeagai.

2.E le lelei le faʻataʻitaʻiga mama.
Fautuaga: O faʻataʻitaʻiga le mama o le a taʻitaʻia ai le le lelei o le toe gaosia o le suʻega, lea e aofia ai le mama o le faʻataʻitaʻiga ma mea muamua.E sili ona lelei le toe faʻamamāina o le faʻataʻitaʻiga, ma o mea muamua e sili ona faʻamamaina e le SDS-PAGE.

3.O le sauniuniga o le PCR ma le teuina o taimi e umi tele.
Fautuaga: Fa'aoga le polokalama PCR Taimi Moni mo le fa'ata'ita'iga PCR i le taimi lava e uma ai tapenaga, ma 'aua le tu'u 'ese mo se taimi umi.

4.E le talafeagai tulaga faʻalauteleina PCR, ma le faʻasologa muamua poʻo le faʻatonuga e le talafeagai.
Fautuaga: fa'amaonia le sa'o o le fa'asologa muamua ma le fa'amuamua e le'i fa'aleagaina;afai e le lelei le faailo o le faʻalauteleina, taumafai e faʻaititia le vevela o le faʻamaʻi ma fetuutuunai le faʻaogaina o mea muamua.

5.O le PCR faiga e le talafeagai, poʻo le faiga e laʻititi tele.
Fautuaga: O le PCR reaction system e la'ititi tele e mafua ai ona fa'aitiitia le sa'o sa'o.E sili ona lelei le fa'aogaina o le faiga fa'afoliga o lo'o fautuaina mai e le mea faigaluega PCR quantitative e toe fa'atino ai le su'ega PCR Taimi Moni.