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Ole fua maualalo ole A260 / A230 e masani lava ona mafua mai i mea leaga ma le maualuga ole umi ole absorption ile 230nm.Se'i tatou va'ai po'o a mea o lo'o aofia ai i nei mea leaga:

  • O filogia masani

    Ole umi ole galu

    Aafiaga fua faatatau

    Polotini

    ~ 230nm ma le 280nm

    Fa'aitiitiga fa'atasi o A260/A 280ma A260/A 280fua faatatau

    Guanidine masima

    220-240 nm

    Faʻaitiitia le A260/A 280fua faatatau

    Phenol

    ~270nm

    -

    Trizol

    ~ 230nm ma le 270nm

    Faʻaitiitia le A260/A 280fua faatatau

    EDTA

    ~230nm

    Faʻaitiitia le A260/A 280fua faatatau

    Ethanol

    230-240 nm

    Faʻaitiitia le A260/A 280fua faatatau

 
 
 
Ole umi ole galu ma le tau fa'atusatusa o mea filogia masani

Pfaaleagaina o le rotein
O le filogia o polotini e mafai ona manatu o le filogia sili ona taatele i le faagasologa o le aveeseina o le acid nucleic.E iai le polotini i le va o le vai i luga ma le pito i laloorganicvaega .O le filogia o le a fa'aitiitia ai le fua faatatau o le A260/A280 ma le A260/A230 i le taimi e tasi, ma o le fua faatatau o le A260/A230 o le a sili atu ona manino le suiga nai lo le fua faatatau o le A260/A280.
I le taimi mulimuli anefa'aliliuga fa'aliliuor qPCR tali, e mafai ona fa'alavelave pe fa'alavelave le fa'agaioiga ole enzyme.O le auala sili e aloese ai mai le faaleagaina o le polotini o le manatua lea o le mataupu faavae o le "nai lo le itiiti ifo nai lo le sili atu, o sina vaega itiiti i le tele o taimi" pe a sua le supernatant.

2. Guanidinium filogia
hydrochloride (GuHCl) ma le guanidine thiocyanate (GTC) o loʻo i ai le aʻafiaga o le denaturing proteins, lea e mafai ona vave faʻaumatia sela sela i le taimi o le faʻaogaina o le nucleic acid, mafua ai le denaturation ma le faʻafefe.Ole umi ole galu ole GuHCl ma le GTC ole va ole 220-240 nm, ma lemasima guanidinium totoe o le a faaitiitia le fua faatatau o le A260/A230.E ui o le toega o le masima guanidinium o le a faʻaitiitia ai le fua,o le a'afiaga i fa'ata'ita'iga i lalo e matua'i fa'atauaina.

3. Trizol faaleagaina
Ole vaega autu ole Trizol ole phenol.O le galuega autu a le phenol o le faʻasaʻoina lea o sela ma faʻasaʻo ai polotini ma vailaʻau nucleic acid i sela.E ui lava e mafai e le phenol ona faʻamalo lelei polotini, e le mafai ona taofia atoa le gaioiga RNase.O le mea lea, o le 8-hydroxyquinoline, guanidine isothiocyanate, β-mercaptoethanol, ma isi mea faʻaopoopo e faʻaopoopoina i le TRIzol e faʻalavelave ai RNase endogenous ma exogenous.
Pe a suʻeina le RNA telefoni feaveaʻi, e mafai e Trizol ona faʻavaveina sela ma faʻalavelaveina le nuclease na tuʻuina mai sela, ma o le Trizol totoe o le a faʻaitiitia ai le fua o le A260 / A230.
Auala o le faʻagasologa: Pe a faʻapipiʻi, e tatau ona maitauina o le phenol i Trizol e faigofie ona solu i le vai i lalo o le tulaga o le 4 ° ma le vevela o le potu.

4. Ethanol toega
E fa'aaogaina le ethanol i le fa'agasologa mulimuli e fa'aoso ai le DNA a'o fa'amavae iona masima e ono noatia i le DNA.Ole umi ole galu ole maualugaabsorption tumutumu oethanol foi i le 230-240 nm, leao le a fa'aitiitia ai fo'i le fua faatatau o le A260/A230.
O le auala e aloese ai mai toega o le ethanol e mafai ona toe faia faalua i le taimi o le elution mulimuli, feula i totonu o lepusa asumo le lua minute e faʻataga ai le ethanol e faʻamalo atoa aʻo leʻi faʻaopoopoina le paʻu mo le faʻafefe.
Ae ui i lea, e tatau ona iloa o le fua faatatau e naʻo se faʻasologa o iloiloga o le lelei o le RNA.Afai o faʻatinoga o loʻo taʻua i luga e matua faʻatulafonoina, o le eseesega i le va o le fua faʻatatau ma le tulaga masani o le a le i ai se aafiaga tele i faʻataʻitaʻiga i lalo.
Oloa Fa'atatau:
Manu Aofa'i RNA Isolation kit
La'au Aofa'i RNA Isolation pusa
Cell Total RNA Isolation kit
La'au Aofa'i RNA Isolation kit Plus


Taimi meli: Feb-10-2023