Ou te talitonu o le a feagai tagata uma ma faʻafitauli faʻapena pe faʻapea pe a fai PCR tali, ae o le tele o ia mea e mafai ona faʻavasegaina i ni faʻafitauli autu se lua:

Laititi tele le fa'alauteleina o le fa'ata'ita'iga gene (fa'aliga);
Ua tele naua le fa'alauteleina o kenera e le fa'atatau.
O le faʻaaogaina o mea faʻaopoopo o se tasi lea o taʻiala masani e foia ai nei faʻafitauli.E masani lava o le matafaioi a additives e lua itu:
fausaga lona luao kenera (fausiaina lona lua);
Fa'aiti'itia fa'ailoga fa'apitoa.
I aso nei, o le a faʻamatala puupuu atu e le faatonu ia te oe mea faʻaopoopo masani i tali PCR ma a latou galuega.
Fa'aopoopo e fa'aitiitia ai le fausaga lona lua
sulfoxide(DMSO)
fa'ata'ita'iga o kenerafa'atasi ai ma mea maualuga GC .Ae ui i lea, o le DMSO e faʻaititia tele foi le gaioiga o le Taq polymerase.O le mea lea, e tatau i tagata uma ona faapaleni le faʻaogaina o mamanu ma le gaioiga o le polymerase.Ua fautua mai le faatonu e mafai ona e faʻataʻitaʻiina faʻasalalauga eseese o le DSMO, pei o le 2% i le 10%, e suʻe ai le faʻatonuga e fetaui ma lau suʻega.
Fa'amama fa'a'ona
O vailaʻau e le o ni ionic, e pei o le 0.1-1% Triton X-100, Tween 20 poʻo le NP-40, e masani ona faʻaititia le DNA fausaga lona lua.E ui lava e mafai e lenei mea ona faʻateleina le faʻalauteleina o le gene template, o le a mafua ai foi le faʻalavelave o le faʻalauteleina e le faʻapitoa.O lea la, o nei mea faaopoopo e aoga lelei mo tali PCR maualalo e aunoa ma ni otaota, ae le lelei mo tali PRC le mama.O le isi fa'amanuiaga ole fa'amama fa'a-ionic ole fa'aitiitia ole fa'aleagaina ole SDS.E masani lava i le taimi o le suʻeina o DNA, o le a aumaia le SDS i le laʻasaga PCR, lea e matua faʻalavelaveina ai le gaioiga o le polymerase.O le mea lea, faʻaopoopo 0.5% Tween-20 poʻo Tween-40 i le tali e mafai ona faʻaitiitia ai aʻafiaga leaga o le SDS.
Petaine_
E mafai e le Betaine ona fa'aleleia atili le fa'alauteleina o DNA e ala i le fa'aitiitia o le fa'atulagaina o fausaga lona lua ma e masani lava o se fa'aopoopoga "mea lilo" i pusa PCR fa'atau.Afai e te manaʻo e faʻaaoga le betaine, e tatau ona e tuʻuina le betaine poʻo le betaine mono-hydrate (Betaine poʻo le Betaine mono-hydrate), ae le o le betaine hydrochloride (Betaine HCl), fetuutuunai i se faʻasalaga mulimuli o le 1-1.7M.E mafai fo'i e le Betaine ona fesoasoani e fa'aleleia atili le fa'apitoa aua e fa'ate'aina ai le fa'alagolagoina o le fa'avaeina o le fa'afefiloi o le DNA/DNA denaturation.
O mea fa'aopoopo e fa'aitiitia ai fa'ama'i fa'apitoa
Formamide
Formamide ose mea fa'apipi'i PCR masani fa'aogaina.E mafai ona tuʻufaʻatasia ma le tootoo tele ma le tootoo laiti i le DNA, ma faʻaitiitia ai le mautu o le master DNA double helix ma faʻaititia ai le vevela o le DNA.O le faʻaogaina o le formamide faʻaaogaina i suʻega PCR e masani lava 1% -5%.
Tetramethylammonium chloride( TMAC)
Tetramethylammonium chloride e mafai ona faʻateleina le faʻapitoa o le hybridization (faʻapitoa faʻapitoa) ma faʻateleina le vevela o le DNA.O le mea lea, e mafai e le TMAC ona aveese faʻamatalaga e le faʻapitoa ma faʻaitiitia le faʻaogaina ole DNA ma le RNA.Afai e te faʻaaogainafa'aliga muamuai le PCR tali, manatua e faʻaopoopo le TMAC, lea e masani ona faʻaaogaina i le faʻatonuga o le 15-100mM.
Isi mea fa'aopoopo masani
I le faʻaopoopoga i vaega e lua o faʻaopoopoga o loʻo taʻua i luga, e tele mea faʻapipiʻi masani i tali PCR, e ui lava e eseese a latou galuega, e taua tele foi.
Magnesium ion
O le magnesium ion o se cofactor taua (cofactor) o le polymerase, o lona uiga, a aunoa ma le magnesium ion, o le polymerase e le galue.Ae ui i lea, o le tele o ion magnesium e mafai foi ona afaina ai le lelei o le polymerase.Ole fa'atonuga o ion magnesium i tali ta'itasi PCR ole a eseese.Chelating agents (e pei o le EDTA poʻo le citrate), o le faʻaogaina o dNTPs ma polotini e aʻafia uma ai le faʻaogaina o ion magnesium.O lea la, afai ei ai ni ou faʻafitauli i lau suʻega PCR, e mafai ona e taumafai e sui tulaga eseese o le magnesium ion, mo se faʻataʻitaʻiga, mai le 1.0 i le 4.0mM, ma le va o le 0.5-1mM i le va.
E taua le matauina o le tele o ta'amilosaga fa'a'aisa-liu e mafai ona ta'ita'iina atu ai le fa'avasegaina o le fa'aputuga ole magnesium chloride solution.O le mea lea, e tatau ona e faʻamavae atoa aʻo leʻi faʻaaogaina, ma faʻafefiloi lelei aʻo leʻi faʻaaogaina.
Serum albumin o povi(Bovine albumin, BSA)
I su'esu'ega kemisi mole, o le albumin serum bovine o se fa'aopoopoga masani, aemaise lava i le fa'asaina o le enzyme fa'ama'i ma su'ega PCR.I tali PCR, e fesoasoani le BSA i le faʻaitiitia o mea faʻaleagaina e pei o phenolic compounds.Ma ua fai mai foi e mafai ona faaitiitia le pipii o reactants i le puipui o le paipa suʻega.I le tali a le PCR, e masani lava o le maualuga ole BSA faaopoopo e mafai ona oʻo ile 0.8 mg/ml.
 
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