O le PCR o le faʻaaogaina tele o le nucleic acid amplification technology ma e faʻaaogaina lautele ona o lona maʻaleʻale ma le faʻapitoa.Ae ui i lea, e manaʻomia e le PCR le faʻafouina o le vevela ma e le mafai ona faʻateʻaina tapulaʻa o le faʻalagolago i meafaifaʻaili ma meafaigaluega, lea e faʻatapulaʻa ai lona faʻaogaina i suʻega falemaʻi.

Talu mai le amataga o le 1990s, o le tele o fale suʻesuʻe ua amata ona atiaʻe tekinolosi faʻateleina le vevela e le manaʻomia ai le faʻafefeteina o le vevela.O lea la ua latou atina'e le fa'aogaina o le fa'aogaina o le isothermal fa'atekonolosi fa'apipi'i, fa'agata fa'asuiga fa'atekonolosi fa'aola isothermal, ta'avale fa'atekonolosi fa'aola isothermal, ma fa'alagolago i le fa'asologa o le nucleic acid.Isothermal amplification tekinolosi ma isi tekinolosi. 

Loop-mediated isothermal amplification

O le faʻavaeina o le faʻavae e faʻavae i luga o le mea moni o le DNA o loʻo i totonu o se tulaga paleni malosi i le tusa ma le 65°C.A fa'apipi'i fa'avae so'o se mea fa'avae ma fa'alautele atu i le vaega fa'atasi o le DNA fa'alua fa'alua, o le a ta'ape le isi manoa ma avea ma manoa tasi.

I lenei vevela, e fa'aogaina e le DNA ni mea fa'apitoa e 4 e fa'alagolago ai i se DNA polymerase e fa'asolo-su'iina e fa'asolo ai le fa'asologa o le DNA fa'asolo.

Fuafua muamua vaega faapitoa e 6 F3, F2, F1, B1, B2, B3 i luga o le kenera taula'i, ona mamanuina ai lea o mea e 4 e faavae i luga o nei itulagi patino e 6 (e pei ona faaalia i le ata i lalo):

O le pito i luma i totonu (FIP) e aofia ai F1c ma F2.

O le pito i tua i totonu (BIP) e aofia ai le B1c ma le B2, ma o le TTTT o loʻo faʻaaogaina e fai ma avanoa i le ogatotonu.

O pito pito i fafo F3 ma le B3 o lo'o faia fa'atasi i vaega F3 ma le B3 i le kenera fa'atatau.

I le faiga fa'afoliga LAMP, o le fa'auluuluga o le pito i totonu e fa'atele i le fa'atosina o le pito i fafo.O le pito i totonu e muamua tu'ufa'atasia ma le manoa fa'ata'ita'i e tu'ufa'atasia se manoa fa'aopoopo e fai ai se manoa fa'alua DNA.Mulimuli ane, o le pito i fafo e tu'ufa'atasia ma le fa'ata'ita'iga e fai ai se DNA fa'alua.I lalo o le gaioiga a le BstDNA polymerase, o le fusi faʻatasi na faʻapipiʻiina e le pito i totonu e faʻasaʻolotoina.A mae'a se fa'asologa o tali, o le fusi fa'atasi e iu lava ina fausia se manoa DNA e tasi ma se fausaga o le dumbbell.

O le fa'asologa o le dumbbell DNA o lo'o fa'aaogaina e fai ma fa'ata'ita'iga e fa'aauau ai le fa'atupuina o se DNA fa'asolosolo fa'amaufa'atasi ma se pito matala.O mea muamua i totonu ma fafo e ta'ita'ia ai le DNA e fa'aauau pea ona fa'asolo ma fa'auluina ala, ma i'u ai ina fa'atupu le tele o fausaga fa'a'a'a'ai e eseese umi.fa'afefiloi DNA.

Itu lelei ma le le lelei o le faʻalauteleina o le isothermal loop-mediated

Tulaga lelei o LAMP:

(1) maualuga le faʻaleleia lelei, lea e mafai ona faʻamalosia lelei le 1-10 kopi o le kenera taulaʻi i totonu ole 1h, ma le faʻaleleia lelei o le 10-100 taimi nai lo le PCR masani.

(2) E puupuu le taimi tali, e malosi le faʻapitoa, ma e leai se meafaigaluega faʻapitoa e manaʻomia.

Fa'aletonu ole LAMP:

(1) O mea e manaʻomia mo primers e sili ona maualuga.

(2) O le oloa faʻateleina e le mafai ona faʻaogaina mo le faʻapipiʻiina ma le faʻasologa, ae mafai ona faʻaaogaina mo le faʻamasinoga.

(3) Ona o lona lagona malosi, e faigofie ona fausia aerosol, mafua ai mea sese ma afaina ai taunuuga o suʻega.

Sfa'atelega fa'ase'e

Strand displacement amplification (SDA) o se in vitro isothermal DNA amplification technique e faʻavae i luga o le enzymatic reaction na muamua faʻatūina e le tagata atamai Amerika Walker i le 1992.

O le faiga faavae o le SDA e aofia ai le endonuclease faʻatapulaʻaina, o le DNA polymerase faʻatasi ai ma strand displacement gaioioiga, lua paga o primers, dNTPs, ma le calcium ma le magnesium ions ma le paʻu.

O le fa'avae o le fa'alauteleina o le fa'aputuga o laina e fa'avae i luga o le fa'atonuga fa'agata fa'asaina endonuclease fa'asologa i pito uma e lua o le DNA fa'atatau.O le endonuclease e tatalaina le avanoa i le manoa DNA i lona nofoaga e iloagofie ai, ma o le DNA polymerase e faʻalauteleina le va 3' Faʻaiʻu ma sui le isi DNA e sosoo ai.

E mafai ona tu'u fa'atasi ma fa'auluuluga ma fa'alautele atu i laina fa'alua e le DNA polymerase.O lenei faiga e fa'aauau pea, ina ia fa'atupuina lelei le fa'asologa fa'atatau.

Tulaga lelei ma fa'aletonu ole fa'atekonolosi fa'ateleina fa'ase'esega

Tulaga lelei o le SDA:

O le faʻaleleia lelei e maualuga, o le taimi tali e puupuu, faʻapitoa e malosi, ma e leai se mea faʻapitoa e manaʻomia.

Fa'aletonu ole SDA:

O oloa e le toniga, ma o nisi o oloa faʻapipiʻi tasi ma faʻalua faʻapipiʻi e masani ona gaosia i le taamilosaga SDA, ma o le a mautinoa le tupu o le siʻusiʻu pe a iloa e le electrophoresis.

Rolling circle amplification

O le fa'alauteleina o le li'o ta'avale (RCA) o lo'o fa'atulagaina e ala i le tusia o le auala e kopiina ai le DNA mai meaola fa'ama'i e ala i le ta'avale li'o.E faʻatatau i le faʻaogaina o le DNA lapotopoto tasi e fai ma faʻataʻitaʻiga i se vevela tumau, ma se DNA polymerase faʻapitoa (e pei o le Phi29) ) I lalo o le gaioiga o le faʻasologa o le DNA faʻasolosolo taʻavale e ausia ai le faʻalauteleina o le kenera taulaʻi.

E mafai ona vaevaeina RCA i le faʻalauteleina o le laina ma le faʻateleina faʻateleina.Ole lelei ole RCA laina e mafai ona oʻo ile 10⁵taimi, ma le lelei o le RCA faʻateleina e mafai ona oʻo i le 10⁹taimi.

Fa'avasegaga faigofie, e pei ona fa'aalia i le ata o lo'o i lalo, o le fa'alauteleina o le laina a na'o le 1 fa'aaoga, fa'asili fa'atele b e 2 fa'amuamua.

Linear RCA e ta'ua fo'i tasi le primer RCA.O se mea muamua e fusifusia i le DNA lapotopoto ma faʻalauteleina e le gaioiga ole DNA polymerase.O le oloa o se laina laina tasi ma se numera tele o faʻasologa faʻasolosolo faʻaafe afe taimi le umi o le matasele tasi.

Talu ai o le oloa o le laina RCA e fesoʻotaʻi i taimi uma i le amataga amata, o le faʻamautuina faigofie o le faailo o se mea sili ona lelei.

RCA Exponential, lea e taʻua foi o le Hyper branched amplification HRCA (Hyper branched RCA), i le RCA exponential, tasi primer amplifies le oloa RCA, o le primer lona lua hybridizes ma le oloa RCA ma faalautele, ma o le sui ua uma ona noatia i le oloa RCA O primers pito i lalo e faalautele atu le manoa, ma toe fai faalautelega ma sui e maua ai se oloa dendritic RCA amp.

Le lelei ma le le lelei o le rolling circle nucleic acid amplification

Tulaga lelei o le RCA:

Faʻalogo maualuga, faʻapitoa lelei ma faigofie le faʻaogaina.

Fa'aletonu ole RCA:

Fa'afitauli i tua a'o su'eina fa'ailo.I le taimi o le tali RCA, o le su'esu'ega pa'u e le'i fa'asalalauina ma le fa'ata'ita'iga DNA po'o le RNA o le su'esu'ega e le'i fusifusia e ono fa'atupuina ai ni fa'ailoga fa'aalatua. 

Nucleicacid fa'asologa fa'avae fa'atuputeleina

Nucleic acid sequence-based amplification (NASBA) ose tekonolosi fou ua atiaʻe i luga ole PCR.O le fa'aauau pea ma le isothermal nucleic acid amplification e ta'ita'ia e se pa'aga fa'atasi ma se fa'asologa fa'alauiloa T7.E mafai e le tekonolosi ona faʻalauteleina le RNA faʻataʻitaʻiga e tusa ma le 109 taimi ile 2 itula, lea e 1000 taimi maualuga atu nai lo le PCR masani ma e le manaʻomia ni meafaigaluega faʻapitoa.

O lenei tekinolosi ua faʻaaogaina mo le vave suʻesuʻeina o faʻamaʻi i le taimi lava na aliali mai ai, ma o le tele o kamupani o loʻo faʻaogaina nei lenei metotia i pusa suʻesuʻe RNA.

E ui lava e mafai e le faʻalauteleina o le RNA ona faʻaogaina le tekonolosi PCR faʻaliliu, NASBA e iai ona lava lelei: e mafai ona faʻatinoina i lalo ole tulaga vevela tumau, ma e sili atu ona mautu ma saʻo nai lo tekinolosi PCR masani.

O le tali e 41 tikeri Celsius ma e manaʻomia le AMV (avian myeloblastosis virus) reverse transcriptase, RNase H, T7 RNA polymerase ma se pea o primers e faʻamaeʻa.

O le faagasologa e aofia ai:

O le pito i luma o loʻo i ai le faʻasologa faʻatasi o le T7 faʻalauiloa.I le taimi o le tali, o le pito i luma e fusifusia i le RNA strand ma faʻapipiʻiina e le AMV enzyme e fausia ai se DNA-RNA faʻalua.

RNase H e su'eina le RNA i le fusi fa'alua ma taofi le DNA tasi.

I lalo o le gaioiga a le faʻasologa faʻasolosolo ma le enzyme AMV, o se DNA faʻalua faʻatasi o loʻo i ai le T7 promoter sequence ua fausia.

I lalo o le gaioiga a le T7 RNA polymerase, ua maeʻa le faʻasologa o tusitusiga ma maua ai le tele o le RNA faʻamoemoe.

Tulaga lelei o le NASBA:

(1) O lona amataga o loʻo i ai le T7 promoter sequence, ae o le DNA faʻalua faʻalua mai fafo e leai se T7 promoter sequence ma e le mafai ona faʻateleina, o lea o lenei tekinolosi e maualuga le faʻapitoa ma le maaleale.

(2) NASBA tu'ufa'atasia sa'o le fa'asologa o fa'aliliuga fa'asaga i le fa'atupu fa'ateleina, fa'apu'upu'u le taimi fa'aalia.

Le lelei ole NASBA:

(1) E sili atu le lavelave o vaega tali.

(2) E tolu ituaiga o enzymes e manaʻomia e faʻateleina ai le tau o le tali.