Fa'alogoga fa'alogo (HL) o le fa'ama'i fa'aletonu fa'alogo masani i tagata.I atunuu atiaʻe, e tusa ma le 80% o faʻamaʻi tutuli aʻo leʻi tautala i gagana a tamaiti e mafua mai i mea tau kenera.Ole mea sili ona taatele ole fa'aletonu ole tasi (e pei ona fa'aalia i le Ata 1), 124 gene suiga ua maua e feso'ota'i ma le fa'alogo le fa'alogo i tagata, o isi mea e mafua mai i mea tau le siosiomaga.O se mea faʻapipiʻi (o se masini faaeletonika e tuʻuina i totonu o le taliga i totonu e tuʻuina saʻo ai le eletise i le nerve suʻega) e sili atu ona aoga mo le togafitia o le HL ogaoga, ae o se fesoasoani faʻalogo (o se masini eletise fafo e liua ma faʻateleina galu leo) e mafai ona fesoasoani i Tagata maʻi e feololo le HL.Ae ui i lea, e leai ni vailaʻau o loʻo avanoa e togafitia ai le HL (GHL).I tausaga talu ai nei, ua maua ai le faʻalauteleina o togafitiga faʻapitoa e avea o se auala faʻamaonia e togafitia ai le faaletonu o le taliga i totonu.

Ata 1.Tufatufaina o ituaiga fesuiaiga e fesootai ma tutuli.[1]

Talu ai nei, na faʻasalalau ai e saienitisi mai le Salk Institute ma le Iunivesite o Sheffield se suʻesuʻega i le Molecular Therapy - Methods & Clinical Development [2], lea na faʻaalia ai le lautele o le faʻaogaina o faʻamoemoega mo in vivo gene therapy o le tutuli tuufaasolo.Uri Manor, polofesa suʻesuʻe lagolago i le Salk Institute ma le faatonu o le Waitt Center for Advanced Biophotonics, fai mai na fanau mai o ia ma le ogaoga o le faʻalogo ma lagona o le toe faʻaleleia o le faʻalogo o se meaalofa matagofie.O ana suʻesuʻega talu ai na maua ai o le Eps8 o se porotini faʻatonutonu actin faʻatasi ai ma gaioiga faʻapipiʻi ma faʻapipiʻi;i sela o lauulu cochlear, o le protein lavelave faia e Eps8 ma MYO15A, WHIRLIN, GPSM2 ma GNAI3 e masani lava ona i ai i le tele O le pito o le stereocilia umi, lea faatasi ma MYO15A localize BAIAP2L2 i le pito o le stereocilia puupuu, e manaomia mo le tausiga o fusi lauulu.O le mea lea, e mafai e le Eps8 ona faʻatonutonu le umi o le stereocilia o sela lauulu, lea e taua mo le faʻalogo masani;O le tapeina o le Eps8 po'o le suiga o le a o'o atu ai i le stereocilia pu'upu'u, lea e le mafai ai ona fa'aliliu lelei le leo i fa'ailo eletise mo le iloa o le fai'ai, ma o'o atu ai i le tutuli..I le taimi lava e tasi, o le tagata faigaluega Walter Marcotti, o se polofesa i le Iunivesite o Sheffield, na maua e le mafai ona tupu masani sela o lauulu pe a leai se Eps8.I lenei suʻesuʻega, na galulue faʻatasi ai Manor ma Marcotti e suʻesuʻe pe faʻapipiʻi le Eps8 i sela stereociliary e mafai ona toe faʻaleleia a latou galuega ma, i le isi itu, faʻaleleia le faʻalogo i isumu.Na fa'aogaina e le 'au su'esu'e le adeno-associated virus (AAV) Vector Anc80L65 e tu'uina atu ai le fa'asologa fa'asologa o lo'o i ai le EPS8 fa'ato'aga i totonu o le cochlea o le Eps8-/- pepe fou P1-P2 isumu i le tui fa'amalama fa'amalama lapotopoto;i totonu o sela o lauulu cochlear isumu O le galuega a le stereocilia na toe faaleleia a'o le'i matutua;ma o le a'afiaga o le toe fa'aleleia na fa'aalia e ala i ata fa'akomepiuta ma fuaina o le stereocilia.O faʻaiʻuga na faʻaalia ai o le Eps8 na faʻateleina le umi o le stereocilia ma toe faʻaleleia le gaioiga o lauulu lauulu i sela maualalo.Na latou iloa foi, i le aluga o taimi, o sela na foliga mai ua leiloa lo latou gafatia e laveaʻiina e lenei togafitiga o kene.O le uiga o lenei togafitiga atonu e manaʻomia le faia i totonu o le utero, ona o le Eps8-/- o sela o lauulu atonu na matua pe faʻaputu mea leaga e le mafai ona toe faʻaleleia pe a uma ona fananau mai isumu."Eps8 o se porotini ma le tele o galuega eseese, ma e tele lava mea e suʻesuʻe," o le tala lea a Manor.O su'esu'ega i le lumana'i o le a aofia ai le su'esu'eina o le a'afiaga o le Eps8 gene therapy i le toe fa'afo'isia o le fa'alogo i la'asaga eseese o le atina'e, ma pe ono mafai ona fa'aumi avanoa mo togafitiga.Na faʻafuaseʻi, ia Novema 2020, Polofesa KarenB Avraham o Tel Aviv University i Isaraelu lomia ana iʻuga i le tusi talaaga EMBO Molecular Medicine [3], e faʻaaoga ai se tekonolosi faʻafomaʻi faʻafomaʻi e fatu ai se siama e fesoʻotaʻi ma adeno e le afaina AAV9-PHP.B, O le faaletonu o le gene i totonu o sela lauulu o Syne4-/- mice na toe faʻaleleia e ala i le tuiina o se siama o loʻo tauaveina le faʻasologa o le coding o Syne4 i totonu o le taliga i totonu o isumu, e mafai ai ona ulufale i totonu o sela o lauulu ma faʻasaʻo ai mea faʻapitoa e feaveaʻi, faʻatagaina i latou e matua ma galue masani (pei o le Ata 2).

Ata 2.Fa'ata'ita'iga fa'ata'ita'iga o le tino o le taliga i totonu, fa'atasi ai ma le taula'i atu i le okeni o Corti ma le galuega feavea'i o nesprin-4.

E mafai ona vaʻaia o le faʻaogaina o le gene therapy e ausia ai le faʻamoemoega o le togafitia o faʻamaʻi faʻamaʻi i le gene level e ala i le faʻaofiina, aveese pe faʻasaʻo soʻo se genes mutated mo togafitiga (o lona uiga, pulea suiga o le kenera i le faʻamaʻi) e maualuga lona aafiaga ile falemaʻi.fa'amoemoega talosaga.O auala o lo'o i ai nei mo togafitiga fa'aletagata mo le logonoa e le atoatoa e mafai ona vaevaeina i vaega nei:

suia o kenera

O le suia o le kenera e mautinoa lava o le ituaiga sili ona "saʻo" o togafitiga o kene, e faʻavae i luga o le faʻamaonia ma le suia o se kene faʻaletonu i se kopi masani poʻo le vao o le gene.Muamua su'esu'ega fa'ama'i ga'o taliga i totonu mo le fa'alogo na mafua ona o le tapeina o le vesicular glutamate transporter 3 (VGLUT3) gene;AAV1-faʻasalalauga tuʻuina atu o le VGLUT3 faʻateleina le faʻaalia i totonu o taliga taliga sela (IHCs) E mafai ona iʻu ai i le toe faʻaleleia o le faʻalogo, toe faʻaleleia o le morphology morphology vaega lipine, ma tali faʻafefe [4].Ae ui i lea, i faʻataʻitaʻiga e aofia ai le sui o le kenera e lua na tuʻuina atu e le AAV o loʻo faʻamatalaina i le folasaga o loʻo i luga, e taua le maitauina o faʻataʻitaʻiga o isumu e faʻaaogaina mo nisi ituaiga o faʻamaʻi faʻaleagaina faʻalogo faʻalogo e ese le tumau mai tagata, ma i le P1 mice, o le taliga i totonu o loʻo i le tulaga matua o le atinaʻe.I se faaeseesega, o tagata e fananau mai ma se taliga matua i totonu.O lenei eseesega e taofia ai le fa'aogaina o i'uga o le isumu i le togafitia o fa'aletonu o le tutuli fa'aletagata se'i vagana ua tu'uina atu le fa'aine i taliga o isumu matutua.

Fa'asologa o Gene: CRISPR/Cas9

Pe a faatusatusa i le "gen suitulaga", o le atinaʻeina o le faʻavasegaina o faʻataʻitaʻiga na aumaia le vaveao o le togafitia o faʻamaʻi faʻamaʻi mai le aʻa.O le mea taua, o le fa'asologa o kenera e fa'aleleia ai fa'aletonu o auala fa'aleaganu'u fa'aleaganu'u masani e le talafeagai mo fa'ama'i tutuli fa'ale-aganu'u, ma le fa'afitauli e le umi se taimi e fa'apea ai.Ina ua maeʻa ona tuʻituʻi faʻapitoa e le au suʻesuʻe Saina le Myo6C442Y mutant allele i Myo6WT / C442Y mice e faʻaaoga ai le AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2 gene editing system, ma i totonu ole 5 masina o le tuʻituʻi, mice Na toe faʻaleleia le galuega suʻega o le faʻataʻitaʻiga;i le taimi lava e tasi, na maitauina foi le faʻaleleia o le ola o sela o lauulu i totonu o le taliga i totonu, o foliga o le cilia na faʻasolosolo, ma faʻasaʻo faʻailoga electrophysiological [5].O le suʻesuʻega muamua lea i le lalolagi e faʻaaoga ai le CRISPR / Cas9 tekinolosi mo le togafitia o le tutuli tuufaasolo e mafua mai i le Myo6 gene mutation, ma o se suʻesuʻega taua le alualu i luma o tekinolosi faʻasologa o kene mo le togafitia o le logonoa.O le fa'aliliuga a le falema'i o togafitiga e maua ai se fa'avae fa'asaienisi mautu.

Metotia fa'ata'ita'iina o kenera

Ina ia mafai ona manuia togafitiga o kene, e le mafai e molelaula DNA le lavalava ona ulu lelei i sela ona o lo latou hydrophilicity ma le le lelei o le tau o vaega phosphate, ma ia mautinoa le saʻo o le faʻaopoopoina o le nucleic acid mole, e tatau ona filifilia se auala saogalemu ma aoga.O le DNA faʻaopoopo e tuʻuina atu i le sela taulaʻi poʻo le aano.AAV o loʻo faʻaaogaina lautele e fai ma taʻavale tiliva mo togafitiga faʻamaʻi ona o le maualuga o le faʻamaʻi pipisi, le maualalo o le immunogenicity, ma le lautele o le tropism i ituaiga eseese.I le taimi nei, o se tino tele o galuega suʻesuʻe ua fuafuaina le tropism o subtypes eseese o le AAV e faʻatatau i ituaiga sela eseese i le cochlea o le isumu.O le fa'aogaina o uiga o le tu'uina atu o le AAV fa'atasi ma le fa'auluuluga fa'apitoa e mafai ona maua ai fa'amatalaga fa'apitoa, lea e mafai ona fa'aitiitia ai a'afiaga.E le gata i lea, i le avea ai ma se mea e sui ai le AAV vectors masani, o loʻo faʻaauau pea ona atiaʻe faʻasalalauga fou AAV ma faʻaalia ai le maualuga o le faʻaliliuina o le taliga i totonu, lea o le AAV2/Anc80L65 e sili ona faʻaaogaina.E mafai ona toe vaevaeina auala e tuʻuina atu ai e le o faʻamaʻi i auala faʻaletino (microinjection ma electroporation) ma metotia faʻainisinia (lipid-based, polymer-based, ma auro nanoparticles).O auala uma e lua na faʻaaogaina i le togafitia o faʻafitauli o le tutuli tuufaasolo ma ua faʻaalia ai tulaga lelei ma tapulaʻa eseese.I le faaopoopo atu i le taʻavale tuʻuina atu mo togafitiga faʻapitoa e pei o se taʻavale, e mafai ona faʻaaogaina auala eseese mo in vivo gene administration e faʻavae i luga o ituaiga eseese o sela, auala o le pulega, ma le aoga o togafitiga.O le lavelave o le fausaga o le taliga i totonu e faigata ai ona oʻo atu i sela taulaʻi ma e telegese le tufatufaina atu o vailaʻau faʻataʻitaʻi genome.O le labyrinth membranous e tu i totonu o le ponaivi labyrinth o le ponaivi faaletino ma e aofia ai le ala o le cochlear, ala semicircular, utricle, ma le paluni.O lona tu'u'ese'esega, la'ititi le ta'amilosaga o le lymphatic, ma le vavae'ese mai le toto e ala i le pa'u paso-toto e fa'atapula'a ai le tu'uina atu lelei o togafitiga i na'o isumu pepe.Ina ia maua mai viral titers talafeagai mo le togafitiga o kene, tuusa'o fa'apitonu'u tui viral vectors i totonu o le taliga e mana'omia.O ala fa'atūina o tui e aofia ai [6]: (1) fa'amalama fa'amalama lapotopoto (RWM), (2) tracheostomy, (3) endolymphatic po'o perilymphatic cochleostomy, (4) lapotopoto fa'amalama fa'amalama fa'atasi ma Tube fenestration (CF) (pei o le Ata 3).

Ata 3.Tu'u atu taliga i totonu ole fa'ama'i.

E ui lava o le tele o le alualu i luma ua faia i le gene therapy, e faʻavae i luga o sini faʻaliliuga falemaʻi, e manaʻomia le tele o galuega aʻo leʻi mafai ona avea le faʻamaʻi faʻamaʻi o se togafitiga muamua mo tagata mamaʻi e maua i faʻamaʻi faʻamaʻi, aemaise lava i le atinaʻeina o vectors saogalemu ma aoga ma auala e tuʻuina atu ai.Ae matou te talitonu i le lumanaʻi lata mai, o nei ituaiga o togafitiga o le a avea ma faʻavae o togafitiga faʻapitoa ma o le ai ai se aafiaga lelei tele i olaga o tagata e iai faʻafitauli faʻapitoa ma o latou aiga.

Ua fa'alauiloa fo'i e Foregene se pusa su'esu'e maualuga mo kenera fa'atatau, e saosaoa ma mafai ona fa'atino fa'aliliuga fa'aliliu ma tali qPCR e aunoa ma le fa'aaogaina o le RNA.

Oloa So'oga

Cell Direct RT-qPCR kit—Taqman/SYBR GREEN I

Mo nisi fa'amatalaga o oloa, fa'amolemole fa'afeso'ota'i:

overseas@foregene.com