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Fa'atuina SOP fa'ata'ita'iga PCR e fa'ata'atia ai le amio a tagata faigaluega fa'ata'ita'i.

4.1

E tausisi le tagata su'esu'e i faiga fa'agaioiga, ma fa'aitiitia le fa'aleagaina o le PCR e ono mafua mai i mea fa'aletagata po'o le taofia o le tupu mai o le filogia.E le gata i lea, e tatau i le tagata suʻesuʻe ona i ai le poto faʻapolofesa talafeagai ma tomai, e aofia ai le faʻaogaina o meafaigaluega e fesoʻotai i ai, faʻamalamalamaina le faagasologa atoa o galuega, faʻataʻitaʻiina o metotia togafitiga o le faʻaleagaina ma le lelei o fale suʻesuʻe, ma mafai ona faʻamatalaina saʻo iʻuga o suʻega.

Fa'atuina se su'esu'ega PCR masani.

4.2

PCR falesuesue ua vaevaeina i vaega e fa i mataupu faavae, e taʻua o reagent nofoaga sauniuni, vaega faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga, nofoaga faʻalauteleina, ma le faʻalauteleina o suʻesuʻega o oloa.O vaega muamua e lua o vaega muamua o le faʻalauteleina, ma o vaega mulimuli e lua o vaega faʻasolosolo.E tatau ona matua vavae ese le sone muamua ma le sone pe a maeʻa.Mea faʻataʻitaʻi, reagents, pepa puʻeina, peni, mea faʻamamā, ma isi, e mafai ona naʻo le tafe mai le vaega muamua o le faʻalauteleina i le vaega o le faʻauluina, o lona uiga, mai le nofoaga sauniuni reagent → nofoaga faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga → nofoaga faʻalautele → faʻalauteleina mea e suʻesuʻeina ai oloa, ma e le tatau ona tafe i tua.O le ea i totonu o le fale suʻesuʻe e tatau foi ona tafe mai le vaega muamua o le faʻalauteleina i le nofoaga pe a uma le faʻalauteleina, ae le o le tafe i tua.Ole mamanu ole su'esu'ega PCR o lo'o fa'aalia i lalo:

4.3

Ata A: Faiga fa'atulagaina fale su'esu'e PCR lelei fa'atasi ai ma le mamafa o le mamafa i totonu o le potu pa'u

4.4

Ata B: Faiga fa'atulagaina falesuesue PCR lelei ma le mamafa lelei i totonu o le potu pa'u

O ata fa'atulagaina o falesu'esu'e PCR o lo'o tu'uina atu i le Ata A ma le Ata B e tatau ona sili atu ona lelei le fa'atulagaina, ma o le falesu'esu'e ma tulaga e mafai ona fa'asino i lenei faiga mo le mamanu.Mo fale suʻesuʻe masani, e fautuaina e mafai ona vavaeeseina le vaega o le PCR amplification ma le vaega o suʻesuʻega o oloa, ma o le tatalaina o le ufiufi e tatau ona faʻaitiitia i le tele e mafai ai i totonu o le vaega sauniuni faʻataʻitaʻiga ma le PCR amplification area.Manatua: O oloa ma sapalai fa'ata'ita'i i totonu o le vaega o su'esu'ega o oloa e matua fa'asa ona ave i le vaega o tapenaga fa'ata'ita'i ma le vaega e fa'alautele ai le PCR.

4.5

Afai e na'o le su'esu'eina ma le fa'ailoaina e le falesu'esu'e, e fautuaina le fa'aogaina o le PCR fa'ata'ita'i fa'alelei nai lo le PCR masani.

Fluorescence quantitative PCR detecting results e mafai ona aoina ma auʻiliʻili e faailo fluorescence, o lea e leai se manaʻoga e tatala le tapuni mo le electrophoresis pe a maeʻa le tali, lea e aloese ai mai le faʻaleagaina o le PCR e mafua mai i le faʻafefe o oloa tali e fausia ai aerosol.Afai e te fa'aopoopoina le aofa'i o fa'amatala pulou i le taimi o le fa'amomoliina o le gel electrophoresis, e ono tula'i mai le fa'aleagaina o le ea.E fautuaina e fa'alauiloa le fa'aogaina o le PCR quantitative ma faasolosolo malie ona sui le PCR qualitative.

O le UNG anti-PCR product contamination system e fa'aoga mo le PCR reaction.

E fa'aoga e le faiga le dUTP nai lo le dTTP.A maeʻa le tali a le PCR, o mea uma PCR (DNA fragments) e tuʻufaʻatasia ma le dUTP;i le isi taamilosaga o le PCR tali, o le UNG enzyme faaopoopo i le faiga e incubated i le 37 ° C mo le 5 minute aʻo leʻi faia le PCR, lea e mafai ona faʻaleagaina uma vaega DNA o loʻo i ai le dUTP, ona faia lea o le PCR reaction.E mafai e lenei mea ona aveese atoa le fa'aleagaina o le aerosol e mafua mai i oloa PCR.O le aafiaga o loʻo faʻaalia i le ata o loʻo i lalo:

4.6

Fa'aaliga: Mo le fa'asologa PCR sa'o, e mafai ona e filifilia le fa'asologa o oloa o le anti-PCR product contamination system of Foregene.Fautua

Mo fale su'esu'e o lo'o faia su'esu'ega fa'a-genotyping tetele, e matua fautuaina lava e fa'aoga le UNG anti-PCR product contamination system mo su'ega reagents fa'aopoopo i le fausiaina o fale su'esu'e talafeagai.

Faamanatu: O le faʻaogaina o lenei faiga e le mafai ona aveese le faʻaleagaina o oloa PCR ua uma ona tupu.O le mea lea, e tatau ona faʻaogaina le UNG system i le amataga o le suʻega talafeagai, ma le UNG system e tatau ona faʻaogaina mo le PCR faʻateleina, ina ia puipuia ai le faʻaleagaina o oloa PCR False positive.

E fautuaina le faʻaogaina o le Direct PCR-UNG system of Foregene pe a faʻatautaia suʻega tetele, e pei o:

La'au La'au Tu'usa'o PCR Kit-UNG;

Fua Toto Tu'usa'o PCR Kit-UNG;

Tissue Manu Direct PCR Kit-UNG;

Kit PCR Tu'usa'o Si'u Isu-UNG;

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.

Le fa'asologa o pusa mai Foregenee le gata e mafai ona faia PCR suʻesuʻe vave ma i luga o se fua tele, ae lelei foi puipuia ma pulea PCR contamination oloa.


Taimi meli: Mati-19-2021