O le PCR tuusa'o o se tali e fa'aogaina sa'o ai aano o manu po'o la'au mo le fa'ateleina e aunoa ma le su'eina o le nucleic acid.I le tele o auala, e galue tuusaʻo PCR pei ole PCR masani

O le eseesega autu o le faʻaoga masani faʻaaogaina i le PCR tuusaʻo, o le faʻataʻitaʻiga e mafai ona tuʻu saʻo i le tali PCR e aunoa ma le faʻaaogaina o le nucleic acid, ae o loʻo i ai manaʻoga talafeagai mo le faʻapalepale o enzymes ma le fetaui o le paʻu o loʻo aʻafia i le tali saʻo PCR.

E ui lava o loʻo i ai le tele pe itiiti ifo o le iniseti PCR i faʻataʻitaʻiga masani, e mafai lava e PCR tuusaʻo ona ausia le faʻateleina faʻalagolago i lalo o le gaioiga a enzymes ma paʻu.Ole tali masani a le PCR e mana'omia ai le maualuga ole nucleic acid e fai ma fa'ata'ita'iga, e mafai ona fa'alavelaveina le sologa lelei o le fa'agaioiga o le PCR pe a fai o lo'o iai polotini ma isi mea leaga ile mamanu.O le Direct PCR o se tasi lea o tekinolosi sili ona lauiloa i le tulaga o suʻesuʻega mole.

01 Direct PCR na fa'aaoga muamua mo manu ma la'au

O le uluai faʻaogaina o le PCR tuusaʻo o loʻo i totonu o le fanua o manu ma laau, e pei o le toto, aano ma lauulu o le isumu, pusi, moa, lapiti, mamoe, povi, ma isi, laʻau laʻau ma fatu, ma isi, faʻaaogaina e suʻesuʻe ai le genotyping, transgenic, plasmid detection, Gene knockout analysis, DNA source identification, ituaiga faʻamatalaga, suʻesuʻega SNP ma isi fanua.

O nei fanua o loʻo i ai nisi o foliga masani, o lona uiga, o le sini autu autu e matua maualuga ma o le faʻaaogaina o le nucleic acid e faʻalavelave, o lea e le gata ina mafai e le PCR tuusaʻo ona faʻasaoina le taimi ma maua ai sina aʻafiaga i taunuuga, ae faʻasaoina foi tau.

O le PCR tuusaʻo faʻaaogaina mo le suʻesuʻeina o pathogen o se mataupu o tausaga talu ai nei, o nisi tagata gaosi PCR reagent ua faia le tele o taumafaiga i lenei itu pe a faia ni mea fou.Aemaise lava i lenei faʻamaʻi COVID-19, o loʻo faʻaalia le tele o mea faʻapitoa faʻapea i luga o le maketi, e pei o le SARS-CoV-2 Nucleic Acid Detection Kit (Multiplex PCR Fluorescent Probe Method) suʻesuʻe ma atiina ae e Foregene, lea e faʻaogaina ai le Real-time RT PCR technology (rRT-PCR) mo le suʻesuʻeina faʻamaonia o le SARS-CoV-2, faʻataʻitaʻiga o le nacleic acid i totonu o le tagata.

Foregene o se tasi o kamupani o loʻo faʻaogaina le tekonolosi PCR Direct, mo le suʻeina o le masani ORF1ab, N, E, maeseese gafa ole nucleic acids ile nasopharyngeal ole tagata po'o fa'ata'ita'iga swab oropharyngeal pei ole SARS-CoV-2 B.1.1.7 gafa (UK), B.1.351 gafa (ZA), B.1.617 gafa (IND) ma le P.1 gafa (BR).

02  Reagents e manaʻomia mo PCR tuusaʻo

Fa'ata'ita'iga Lysate

O le faʻataʻitaʻiga lysate e mafai ona faʻatulagaina e oe lava pe faʻatau.O le eseesega i le tuʻufaʻatasia o ituaiga eseese o le lysate o le a faʻaeseese ai le gafatia o le lysing, ona ese ai lea o le taimi lysing.Mo se faʻataʻitaʻiga, mo le saunia o faʻataʻitaʻiga o aano o manu, 30 minute poʻo le po o le lysis e masani ona fautuaina, ma o le lysis solution mo viruses e amata mai i le 3-10 minute.

PCR master mix

E fautuaina le fa'aogaina o le DNA polymerase vevela e fa'aleleia atili ai le fa'asili ma fa'atuputeleina le malosi.O le autu o le PCR tuusaʻo o se polymerase sili ona faapalepale.

Aveese pe taofia vaega o le faʻataʻitaʻiga e aʻafia ai le faʻalauteleina o le DNA

A maeʻa ona faʻataʻitaʻiina le faʻataʻitaʻiga i le lysate, o proteins, lipids ma isi otaota sela o le a faʻasaʻoloto, o nei mea o le a faʻalavelaveina le tali PCR.O le mea lea, e manaʻomia e PCR tuusaʻo le faʻaopoopoga o le aveeseina poʻo le iniseti e faʻaitiitia ai le aʻafiaga o nei mea.

03  O se fa'aputuga o fa'amatalaga e lima o le PCR sa'o

Muamua, o le Direct PCR technology o se tekonolosi PCR tuusaʻo mo faʻataʻitaʻiga olaola eseese.I lalo o lenei tulaga faʻapitoa, e leai se manaʻoga e vavae ese ma aveese le nucleic acid, faʻaaoga saʻo le faʻataʻitaʻiga o le tino e fai ma mea, ma faʻaopoopo le faʻasologa o kenera e faʻatino ai le tali PCR.

Lona lua, Direct PCR tekinolosi e le gata o se DNA fa'ata'ita'iga fa'atekonolosi fa'alautele, ae e aofia ai fo'i le RNA template reverse transcription PCR.

Tolu, Fa'atonu PCR tekinolosi e le gata e faia sa'o masani qualitative PCR reactions i tissue samples, ae aofia ai foi Real-Taimi qPCR reactions, lea e manaʻomia ai le faiga tali e maua ai le malosi faʻalavelave faʻalavelave faʻamaʻi tuala ma mafai fluorescence endogenous quenchers le gafatia tetee.

Lona fa, o fa'ata'ita'iga e fa'atatau i le Direct PCR technology e mana'omia na'o le fa'asa'olotoina o fa'ata'ita'iga nucleic acid, ma 'aua ne'i 'ave'esea polotini, polysaccharides, salt ions, ma isi mea e fa'alavelave i le PCR reaction.Le mea e manaʻomia ai le nucleic acid polymerase ma le PCR Mix i le faiga tali e maua ai le teteʻe ma le fetuutuunaʻi lelei e faʻamautinoa ai le gaioiga o le enzyme ma le saʻo o le toe faia i lalo o tulaga faigata.

Lona lima, o le fa'ata'ita'iga fa'ata'ita'iga e fa'atatau i le tekonolosi Direct PCR e aunoa ma se fa'atamaoaigaina o le nucleic acid ma e la'ititi lava le aofa'i o fa'ata'ita'iga, lea e mana'omia ai le fa'aogaina o le faiga e matua'i maualuga le ma'ale'ale ma le fa'aleleia atili.