O le fa'amaoniaina o le fa'atinoga o fa'ata'ita'iga ma su'esu'ega i le amataga o le PCR reagents ma le fa'amautuina o tulaga e sili ona talafeagai e tali atu ai, o mea ia e mana'omia muamua e fa'amautinoa ai le sologa lelei o le alualu i luma o su'ega aloa'ia.
E faʻapefea la ona tatou manaʻomia le faʻamaonia o le suʻega muamua i le amataga?
O faʻailoga autu o le laina faʻavae, faʻalautelega faʻasolosolo, ct tau, faʻaleleia lelei, faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga maualalo, CV, ma isi.
Fa'avae
O le laina fa'avae o le laina fa'alava i le PCR amplification curve.I nai taamilosaga muamua o le PCR amplification reaction, o le faailo o le fluorescence e le suia tele ma fausia ai se laina saʻo.Ole laina sa'o lea ole laina fa'avae.
A'o su'esu'e su'esu'ega muamua a le PCR, fa'alogo lelei pe o le laina fa'avae e maualuga.O le mama o le su'esu'ega muamua o le a a'afia ai le laina fa'avae, e pei o le fa'atupuina o le laina fa'avae e si'itia pe pa'u.O le laina faʻavae o se faʻaaliga sili ona malamalama.
Fa'aliga Pi'o
O le isi fa'ailoga fa'apitoa o le fa'atusa o le fa'aupuga fa'alautele.E sili atu le iai o se pi'o fa'atusa-S e 'alofia ai le fa'ateleina lona lua po'o isi pupuni fa'ateleina fa'aletonu.
Ct Taua
Ole numera o ta'amilosaga e fetaui ma le togi fa'asolo mai le laina fa'avae i le fa'atupulaia fa'ateleina o le tau Ct.
Mo le fa'ata'ita'iga lava lea e tasi, o su'esu'ega fa'avae eseese e i'u ai i pupuni fa'aola 'ese'ese, ma o le tau tutusa o le Ct o le a a'afia i le fa'aleleia lelei ma le fa'alavelave.I le talitonuga, o le laʻititi o le Ct tau o le suʻega muamua tatou te filifilia, o le sili atu lea.
Fa'atelega Lelei
O se tasi o auala sili ona faʻatuatuaina ma mautu mo le suʻesuʻeina o le faʻaleleia o le PCR o le faʻasologa masani, lea e lauiloa foi e tagata suʻesuʻe.O le metotia e aofia ai le faia o se faasologa o faʻataʻitaʻiga e pulea ai le numera faʻatusatusa o faʻataʻitaʻiga faʻamoemoe.O nei faʻataʻitaʻiga e masani lava ona faia e ala i faʻamaʻi faʻasolosolo o fofo faʻasoa faʻapitoa, o le faʻaaogaina masani o le faʻafefe 10.Faʻaaogaina o se faʻasologa o faʻataʻitaʻiga faʻafefeteina, faʻaogaina le polokalame qPCR masani e faʻateleina e maua ai le tau o le Cq, ma mulimuli ane tusi se taʻavale masani e tusa ai ma le faʻatonuga o faʻataʻitaʻiga taʻitasi ma le tau Cq tutusa e maua ai le laina laina Cq = -klgX0 + b, ma le faʻaleleia lelei E = 10 (-1 / k) -1.Pe a faʻaogaina le qPCR mo suʻesuʻega faʻatusatusa, e manaʻomia le faʻaogaina o le faʻaleleia i le va o le 90% -110% (3.6>k>3.1).
Su'esu'ega Fa'ata'ita'i Fa'ata'ita'i maualalo
A maualalo le fa'ata'ita'iga fa'ata'ita'iga, e 'ese'ese fua fa'atatau o su'esu'ega amata eseese.Matou te filifilia ni faʻataʻitaʻiga e 20 maualalo e fai ma faʻataʻitaʻiga, ma o le faiga muamua-suʻesuʻe faʻatasi ma le maualuga maualuga o le suʻesuʻeina e sili ona lelei.
Coefficient of Variation (CV)
10 fa'ata'ita'iga fa'alua e mafai ona maua i su'esu'ega fa'avae eseese e tusa ai ma le tulaga o le laina o le reagent mo le su'esu'eina o le fa'ateleina o le nucleic acid.
Su'ega Fa'atele:
Sa'o
O le saʻo i totonu o le tasi vaega e tatau ona fetaui: o le coefficient o fesuiaiga (CV,%) o le tau logarithmic o le faʻatonuga o suʻega e ≤5%.Pe a maualalo le faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga, o le coefficient o fesuiaiga (CV,%) o le logarithm o le faʻaogaina o le suʻesuʻeina o le ≤10%
Reagents agavaa:
Sa'o
O le sa'o i totonu o le vaega e tasi e tatau ona ausia:
(1) Coefficient o fesuiaiga o le tau Ct (CV,%) ≤5%
Ole fa'ata'ita'iga lava lea e tasi e fa'ata'ita'i fa'atasi mo le 10 taimi, ma e tatau ona fa'atutusa i'uga o su'ega
Taimi meli: Sep-18-2021
