Viral RNA Isolation Kit mo Viral RNA Purification mai Plasma, Serum, ma isi Fa'ata'ita'iga
Fa'amatalaga
O lo'o fa'aogaina e le pusa le koluma vili ma fua fa'atatau na faia e Foregene, lea e mafai ona fa'amanino lelei le RNA viral maualuga ma le maualuga mai fa'ata'ita'iga e pei ole plasma, serum, sua ole tino e leai se sela, ma le supernatant culture cell.O le pusa faʻaopoopo faʻapitoa le Linear Acrylamide, lea e faigofie ona puʻeina ni vaega laiti o RNA mai faʻataʻitaʻiga.RNA-Na'o le Koluma e mafai ona fa'amauina lelei le RNA.E mafai e le pusa ona fa'agasolo le tele o fa'ata'ita'iga i le taimi e tasi.
O le pusa atoa e le o iai le RNase, o lea o le RNA mama o le a le faʻaleagaina.Buffer viRW1 ma le Buffer viRW2 e mafai ona fa'amautinoa o le vaila'au nucleic acid ua maua e leai se polotini, nuclease po'o isi mea leaga, lea e mafai ona fa'aoga sa'o mo su'esu'ega o meaola mole mole i lalo.
Fa'amatalaga
50 Sauniuniga, 200 Sauniuniga
Vaega o pusa
Linear Acrylamide |
Puipui viRL |
Puipui viRW1, Puipui viRW2 |
RNase-Free ddH2O |
RNA-Na'o Koluma |
Faatonuga |
Fa'apitoa & itu lelei
-E leai se mea e popole ai e uiga i le faʻaleagaina o le RNA.Ole pusa atoa ole RNase-Free
-Fa'afaigofie-o fa'agaioiga uma e mae'a ile vevela ole potu
- Anapogi-e mafai ona faʻamaeʻaina le gaioiga i le 20 minute
-O le RNA maualuga: RNA-na'o le Koluma ma le fua fa'atatau e mafai ona fa'amama lelei le RNA
-Saogalemu-e leai se mea fa'aola fa'aoga e fa'aaogaina
-O le tele o faʻataʻitaʻiga gaioiga gafatia-e oʻo atu i le 200μl faʻataʻitaʻiga e mafai ona faʻatautaia i taimi taʻitasi.
- Tulaga maualuga-o le RNA faʻamamaina e sili ona mama, e leai se polotini ma isi mea leaga, ma e mafai ona faʻafeiloaʻi i le tele o faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga.
Fa'asologa o pusa
Fa'aoga pusa:
E talafeagai mo le aveeseina ma le faʻamamaina o le viral RNA i faʻataʻitaʻiga e pei o le plasma, serum, le tino e leai se sela ma le supernatant aganuu.
Fa'agasologa o galuega
Tulaga teuina
- E mafai ona teuina le pusa mo le 24 masina i le vevela o le potu (15-25 ℃), poʻo le 2-8 ℃ mo se taimi umi.
-Linear Acrylamide solution e mafai ona teuina i le vevela o le potu mo le 7 aso.A maeʻa ona maua le pusa, faʻamolemole ave le Linear Acrylamide solution ma teu i le -20℃.
-A uma ona faʻaopoopo le Linear Acrylamide ile Buffer viRL, e mafai ona teuina ile 2-8 ℃ mo le 48h.Fa'amolemole fa'aaoga le vaifofo fou ua saunia.
Ta'iala mo su'esu'ega fa'afitauli
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail:Tech@foregene.com。
E leai se RNA e mafai ona maua mai pe maualalo le gaosiga o le nucleic acid
E masani ona tele mea e aʻafia ai le toe faʻaleleia lelei, e pei o le: faʻataʻitaʻiga RNA anotusi, auala o le faʻagaioiga, elution volume, etc.
Iloiloga o mafua'aga masani:
1. Ta'ele aisa po'o le maualalo o le vevela (4 ° C) centrifugation i le taimi o le taotoga.
Fautuaga: O le vevela o le potu (15-25 ° C) gaioiga, aua le ta'ele aisa ma le centrifuge maualalo.
2. Le lelei le teuina o faʻataʻitaʻiga poʻo le teuina o faʻataʻitaʻiga mo se taimi umi.
Fautuaga: Teu fa'ata'ita'iga ile -80°C po'o le fa'a'aisa ile fa'a'aisa sua, ma 'alofia le fa'aaogaina fa'a'aisa-liu;taumafai e faʻaaoga faʻataʻitaʻiga fou na aoina mo le faʻaaogaina o le RNA.
3. Le lava faʻataʻitaʻiga lysis
Fautuaga: Faʻamolemole faʻamautinoa o le faʻataʻitaʻiga ma le fofo galue (Linear Acrylamide) ua maeʻa faʻafefiloi ma faʻafefe mo le 10 min i le vevela o le potu (15-25 ° C)
4. Ua le sa'o le fa'aopoopoina o le eluent
Fautuaga: Ia mautinoa ua faaopoopo le RNase-Free ddH2O i le ogatotonu o le membrane o le koluma faʻamamaina.
5. Le talafeagai voluma o anhydrous ethanol i Buffer viRW2
Fautuaga: Fa'amolemole mulimuli i fa'atonuga, fa'aopoopo le voluma sa'o o le ethanol anhydrous ile Buffer viRW2 ma fa'afefiloi lelei a'o le'i fa'aogaina le pusa.
6. Fa'aoga fa'ata'ita'iga le talafeagai.
Fautuaga: 200μl o fa'ata'ita'iga ile 500μl ole Buffer viRL.O le tele o fa'ata'ita'iga voluma o le a fa'aitiitia ai le fua fa'atatau o le RNA.
7. le lelei o le elution volume po'o le le atoatoa o le elution.
Fautuaga: O le voluma eluent o le koluma faʻamamaina o le 30-50μl;afai e le faamalieina le aafiaga o le elution, e fautuaina e faʻaopoopo i ai le RNase-Free ddH muamua faʻavevela.2O ma faʻalautele le taimi tuʻu i le vevela o le potu, pei ole 5-10min
8. Fa'amama koluma ei ai ethanol toega ina ua uma ona fufulu i Buffer viRW2.
Fautuaga: Afai e tumau pea le ethanol pe a uma ona fufulu ile Buffer viRW2 ma centrifugation gaogao-tube mo le 2min, e mafai ona tuʻu le koluma faʻamamaina i le vevela o le potu mo le 5min pe a uma le centrifugation gaogao-tube e aveese atoa ai le ethanol totoe.
Le faʻaleagaina o mole RNA mama
O le lelei o le RNA faʻamamaina e fesoʻotaʻi ma mea taua e pei o le teuina o faʻataʻitaʻiga, faʻaleagaina o le RNase, ma le gaioiga.
Iloiloga o mafua'aga masani:
1. O faʻataʻitaʻiga na aoina e leʻi faʻasaoina i le taimi.
Fautuaga: Afai e le faʻaaogaina le faʻataʻitaʻiga i le taimi pe a maeʻa le aoina, faʻamolemole teu i le -80 ℃ poʻo le vai faʻamaʻi vave.Mo le su'eina o molela'au RNA, taumafai e fa'aoga fa'ata'ita'iga fou na aoina pe a mafai.
2. O fa'ata'ita'iga fa'aputuina sa fa'aaisa ma liusua fa'afia.
Fautuaga: Aloese mai le fa'aaisa ma fa'alili (ia le sili atu ma le tasi) i le taimi o le aoina ma le teuina o fa'ata'ita'iga, a leai o le a fa'aitiitia le fua o le nucleic acid.
3. Na fa'afeiloa'i le RNase i totonu o le potu tipitipi pe leai ni totini lima, matapulepule, ma isi mea na ofuina.
Fautuaga: Ole su'ega ole su'ega mole ole RNA e sili ona faia ile potu ta'i RNA, ma fa'amama le laulau fa'ata'ita'i a'o le'i faia le su'ega.Fa'aofu totigilima ma matapulepule i le taimi o le fa'ata'ita'iga e aloese ai mai le fa'aleagaina o le RNA e mafua mai i le fa'aofiina o le RNase.
4.O le reagent e faʻaleagaina e RNase i le taimi o le faʻaaogaina.
Fautuaga: Sui ile Viral RNA Isolation Kit mo su'ega fa'atatau.
5. O le RNase contamination o le centrifuge tubes, pipette tips, ma isi Fautuaga: Ia mautinoa o le centrifuge tubes, pipette tips, ma pipettes uma RNase-Free.
O molelaula RNA mama na a'afia i fa'ata'ita'iga i lalo
O mole RNA faʻamamaina e le koluma faʻamamaina o le a aʻafia ai faʻataʻitaʻiga i lalo pe afai e tele naua ion masima poʻo polotini, e pei ole: faʻaliliuga faʻaliliu, Northern Blot, ma isi.
1.O lo'o totoe ions masima i le eluted RNA molecules.
Fautuaga: Ia mautinoa ua faaopoopo le voluma sao o le ethanol anhydrous i le Buffer viRW2, ma fufulu le koluma faamama faalua e tusa ai ma le sao sao centrifugation i luga o faatonuga faagaioia; Afai o loʻo i ai pea ion masima o totoe, e mafai ona e faʻaopopo le Buffer viRW2 i le koluma faʻamamaina, ma tuʻu i le vevela o le potu mo le 5min.Ona faia lea o le centrifugation e aveese ai iona masima i se tulaga sili
2.O lo'o totoe le ethanol i le molelaula RNA eluted
Fautuaga: o le taimi lava e faʻamaonia ai o koluma faʻamamāina ua fufuluina e Buffer viRW2, fai le centrifugation gaogao-tube e tusa ai ma le saoasaoa centrifugal i luga o faatonuga faʻagaioiga.Afai o lo'o totoe pea le ethanol, e mafai ona tu'u mo le 5 minute i le vevela o le potu pe a mae'a le fa'amama gaogao e aveese ai le ethanol o totoe i le tele.
Tusi Taiala:
Viral RNA Isolation Kit Tusi Taiala